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近红外光响应的肿瘤光热治疗因具有组织穿透性强、生物安全性好等优点,已引起广泛关注。作为新兴的光敏剂,八丁氧基酞菁钯具有成本低、易合成、毒性低等优点,在肿瘤光动力治疗(PDT)领域表现出巨大潜力。由于高渗透强滞留效应(EPR),脂质体作为药物载体可靶向集中于肿瘤组织,同时ROS可氧化破坏脂质双层膜,促进包载药物在肿瘤组织的精准释放。本实验以雷帕霉素为模型药物,采用课题组合成的八丁氧基酞菁钯为光敏剂,制备近红外光触发的ROS响应型雷帕霉素脂质体,并对其理化性质及体外释放特性进行考察。
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回归方程为A = 0.6240 C-0.1738 (r = 0.999 5)。雷帕霉素在0.2~40 μg/ml浓度范围内线性关系良好。
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按照“1.6.1”项下色谱条件测定,雷帕霉素出峰良好,保留时间为7.8 min。表明此方法专属性良好(图1)。
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由表1可知,雷帕霉素在低、中、高3个浓度都具有较好的准确度,日间精密度和日内精密度值均小于5%,表明该方法可用于雷帕霉素的含量测定。
浓度(μg/ml) 日内精密度 日间精密度 检测值(μg/ml) RSD(%) 检测值(μg/ml) RSD(%) 0.50 0.58±0.01 1.62 0.58±0.01 1.13 2.00 1.95±0.02 0.56 1.96±0.01 0.49 10.00 9.36±0.04 0.40 10.02±0.09 0.87 -
由表2可知,雷帕霉素在低、中、高3个浓度的回收率为97.64%~98.62%,符合95%~105%的范围,且RSD值均小于1%,表明该提取方法稳定可靠。
浓度(μg/ml) 检测值(μg/ml) 回收率(%) RSD(%) 0.50 0.57±1.54 113.47 1.69 2.00 1.93±0.02 96.48 0.82 10.00 9.82±0.05 98.21 0.52 -
由表3可知,包含不同摩尔量DLPC的处方制得的脂质体,成膜及水化效果较好,粒径<200 nm,PDI<0.2,雷帕霉素包封率>90%,载药量>1%;脂质体体外释放试验,光照12 h后,测得雷帕霉素药物累积释放率>60%(图2A)。当DLPC含量较低时(DSPC∶DLPC=69∶1),雷帕霉素释放速率明显低于其他处方。随着DLPC含量的增加,雷帕霉素释放速率及12 h内累积释放率并无明显增加。
DSPC:DLPC
(mol:mol)成膜 水化 粒径(l/nm) PDI Zeta电位(mV) 包封率(%) 载药量(%) 69∶1 均匀 无沉淀 139.7 0.051 −12.1 98.71 1.11 65∶5 均匀 无沉淀 173.2 0.194 −12.5 94.20 1.23 60∶10 均匀 无沉淀 143.4 0.035 −13.0 98.43 1.15 50∶20 均匀 无沉淀 126.7 0.165 −14.9 92.64 2.27 40∶30 均匀 无沉淀 120.5 0.173 −14.6 92.94 2.22 -
由表4可知,PC(DSPC+DLPC)与胆固醇之比过大(70∶10)或过小(70∶40),脂质体都不能成膜。当PC与胆固醇之比为70∶20、70∶25、70∶30时,所得脂质体成膜及水化效果较好,粒径<200 nm,PDI<0.2,雷帕霉素包封率>90%,载药量在1%左右。在进行脂质体体外释放实验中,测得12 h后雷帕霉素药物累积释放率>60%(图2B)。
PC∶胆固醇
(mol∶mol)成膜 水化 粒径(l/nm) PDI Zeta电位(mV) 包封率(%) 载药量(%) 70∶10 不均匀 — — — — — — 70∶20 均匀 无沉淀 119.4 0.108 −11.0 96.69 0.96 70∶25 均匀 无沉淀 173.2 0.194 −12.5 94.20 1.23 70∶30 均匀 无沉淀 147.7 0.095 −12.7 94.56 0.88 70∶40 不成膜 — — — — — — -
由表5可知,当DSPE-PEG2000用量较小时,脂质体不能成膜。当PC与DSPE-PEG2000之比为70∶5、70∶10、70∶15时,所得脂质体成膜及水化效果较好,粒径<200 nm,PDI<0.2,雷帕霉素包封率>90%,载药量>1%。在进行的12 h脂质体体外释放实验中,摩尔比70∶5组测得雷帕霉素药物累积释放率>60%,其余两组药物累积释放率在33%左右(图2C)。
PC: DSPE-PEG2000
(mol:mol)成膜 水化 粒径(l/nm) PDI Zeta电位(mV) 包封率(%) 载药量(%) 70∶0 不成膜 — — — — — — 70∶1 不成膜 — — — — — — 70∶5 均匀 无沉淀 173.2 0.194 −12.5 94.20 1.23 70∶10 均匀 无沉淀 136.2 0.144 −12.1 98.13 1.37 70∶15 均匀 无沉淀 108.9 0.197 −11.0 97.07 1.34 -
由表6可知,当PdPC(OBu)8用量较大(质量比1∶50),脂质体不能成膜。当PdPC(OBu)8与PC质量之比为1∶100、1∶200、1∶300、1∶400,测得粒径<200 nm,PDI<0.2,雷帕霉素包封率>90%,载药量>1%。在进行的12 h脂质体体外释放实验中,质量比1∶100、1∶200组释放效率高于其余两组,在60%左右(图2D)。
PdPC(OBu)8 :PC
(m:m)成膜 水化 粒径(l/nm) PDI Zeta电位(mV) 包封率(%) 载药量(%) 1∶400 均匀 无沉淀 179.3 0.140 −12.3 93.92 1.15 1∶300 均匀 无沉淀 157.4 0.143 −11.5 94.23 1.16 1∶200 均匀 无沉淀 145.9 0.142 −14.3 93.26 1.19 1∶100 均匀 无沉淀 136.2 0.144 −12.1 98.13 1.23 1∶50 不均匀 沉淀 — — — — —
Preparation and characterization of photosensitive ROS-responsive rapamycin liposomes
doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202110051
- Received Date: 2021-10-18
- Rev Recd Date: 2022-02-10
- Available Online: 2022-09-29
- Publish Date: 2022-09-25
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Key words:
- liposome /
- rapamycin /
- near infrared light /
- ROS /
- release in vitro
Abstract:
Citation: | GAO Xiqing, LU Guangzhao, LU Ying, ZOU Hao. Preparation and characterization of photosensitive ROS-responsive rapamycin liposomes[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2022, 40(5): 437-441. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202110051 |