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纯阳正气胶囊是由广藿香、姜半夏、土木香、陈皮、丁香、肉桂、苍术、白术、茯苓等十七味中药制成的胶囊剂,主要用于治疗暑天感寒受湿、腹痛吐泻、胸膈胀痛、头痛恶寒、肢体酸重。纯阳正气胶囊是药典中收录的纯阳正气丸[1]的改良剂型,现代医学多用于改善肠胃功能、止泻等急性肠胃炎症状,其处方来源于晚清医书《饲鹤亭集方》,其中的陈皮理气健脾,活性成分橙皮苷可调节肠道菌群[2]、抑制肠道炎症[3];肉桂能改善消化系统,活性成分桂皮醛抗溃疡、抗菌[4];丁香温中、暖肾、降逆,活性成分丁香酚抑菌、镇痛[5];各处方药材药性相辅相成。纯阳正气胶囊参照纯阳正气丸在质量标准的含量测定项下均只有橙皮苷的测定,不能全面评价该制剂的质量。多组分的定量分析已成为中成药质量控制的有效手段[6-7]。本研究采用高效液相色谱法(HPLC)同时对纯阳正气胶囊中的橙皮苷、桂皮醛和丁香酚这3个活性成分进行测定,完善其质量控制方法,为纯阳正气胶囊质量标准的提升提供了依据。
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色谱柱为Agilent Poroshell 120 EC-C18(4.6 mm×150 mm,4 μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱程序为0 ~5 min,15%乙腈;5 ~10 min,15%~25%乙腈;10 ~12 min,25%~ 50%乙腈;12 ~16 min,50%~15%乙腈;柱温为35 ℃;检测波长为284 nm;流速为1.0 ml/min,进样量为10 μl。
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取橙皮苷、桂皮醛和丁香酚对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成浓度为1125、510、991 μg/ml的标准储备液。精密吸取橙皮苷储备液5 ml、桂皮醛储备液1.25 ml、丁香酚储备液4 ml置于同一25 ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,制成混合对照品储备液。精密吸取上述混合对照品储备液适量,加甲醇稀释制成含橙皮苷36 μg/ml、桂皮醛4.08 μg/ml和丁香酚25.37 μg/ml的混合对照品溶液。
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取本品10粒内容物研磨均匀,取粉末约0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 ml,密塞,称定重量,超声20 min,放冷至室温,用甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
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按纯阳正气胶囊处方及制剂工艺,分别制成缺陈皮、缺肉桂和缺丁香的阴性样品,取阴性样品按“2.3”项下供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。
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分别取混合对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液,按“2.1”项下的色谱条件进样,记录色谱图及相关参数。橙皮苷、桂皮醛和丁香酚的保留时间依次为6.983、10.399、11.729 min,分离度均大于1.5,理论塔板数按橙皮苷、桂皮醛和丁香酚的峰计算分别为54733、59111和83997,且阴性样品在对照品相应位置没有吸收峰,表明其他成分对测定无干扰,结果见图1。
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分别精密吸取“2.2”项下的混合对照品储备液0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 ml,置10 ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,按“2.1”项下的色谱条件进行测定。以峰面积Y对浓度X(μg/ml)进行线性回归,结果见表1。
成分 回归方程 相关系数r 浓度范围(μg/ml) 橙皮苷 Y=17.995 X−8.5625 0.999 9 9.00~144.00 桂皮醛 Y=85.799 X−4.5451 0.999 9 1.02~ 16.32 丁香酚 Y=11.864 X−8.1321 0.999 9 6.34~101.48 -
取“2.2”项下制备的混合对照品溶液, 按“2.1”项下的色谱条件进行测定,橙皮苷、桂皮醛和丁香酚的峰面积RSD分别为1.21%、1.14%、0.96%(n=6),表明该方法精密度良好。
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取“2.3”项下制备的供试品溶液(批号:210201),分别于0、2、4、6、8、12、24 h按“2.1”项下的色谱条件测定,记录峰面积。结果橙皮苷、桂皮醛和丁香酚峰面积的RSD分别为1.28%、1.38%、2.77%,表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。
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取同一批次的纯阳正气胶囊(批号:210201)6份,按“2.3”项制备供试品溶液,按“2.1”项下的色谱条件测定,记录色谱峰面积并计算含量。结果橙皮苷、桂皮醛和丁香酚的平均含量分别为4.14、0.45、3.06 mg/g,RSD分别为1.43%、1.71%、1.63%(n=6),表明该方法的重复性良好。
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取已知含量的同一批次的纯阳正气胶囊9份(批号:210201),每份约0.1 g,分别精密加入混合对照品储备液适量,配制成低、中、高3个不同浓度的回收率溶液,每个浓度3份,按“2.3”项下供试品溶液的制备方法操作,按“2.1”项下的色谱条件测定,记录峰面积并计算回收率。结果显示,橙皮苷、桂皮醛和丁香酚的平均回收率分别为101.9%、98.0%、101.2%,RSD值分别为2.3%、1.6%、2.3%(n=9)。
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取4批样品,分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液,按“2.1”项下色谱条件测定,记录色谱峰面积并计算含量,结果见表2。
批号 橙皮苷 桂皮醛 丁香酚 200901 5.04 0.63 3.62 201201 6.30 0.88 3.33 210201 4.14 0.45 3.06 211001 4.56 0.81 3.74
Simultaneous determination of three constituents in Chunyang Zhengqi capsules by HPLC
doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202201059
- Received Date: 2022-01-17
- Rev Recd Date: 2022-06-21
- Available Online: 2024-02-20
- Publish Date: 2024-02-25
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Key words:
- Chunyang Zhengqi capsules /
- hesperidin /
- cinnamaldehyde /
- eugenol /
- content determination
Abstract:
Citation: | WEN Yi, MENG Lulu, WANG Baoyi, WEI Feixue, DENG Peng, LIU Rongying. Simultaneous determination of three constituents in Chunyang Zhengqi capsules by HPLC[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2024, 42(2): 78-81. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202201059 |