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2018年10月,采挖民乐县不同药材基地的黄芪样品28批,经班小军副主任药师鉴定为豆科植物蒙古黄芪的干燥根。每个基地随机挖取整株药材后,阴干,粉碎,过四号筛,备用。同时,以随机多点采样法,采集对应黄芪根基土壤(耕作层约10~30 cm处)样品28份,每份重约1 kg,经充分混合,用四分法缩分后,自然风干,保存,供测试用。试验样品基本信息见表1。
编号 采样地点 海拔(m) 种植面积(亩) 1 顺化镇王家庄村 2 242 200 2 顺化镇王家庄村 2 243 200 3 顺化镇张宋村 2 242 100 4 顺化镇张宋村 2 242 100 5 顺化镇列四坝村基地1 2 348 50 6 顺化镇列四坝村基地1 2 348 50 7 顺化镇列四坝村基地2 2 348 150 8 顺化镇列四坝村基地2 2 348 150 9 顺化镇列四坝村基地3 2 346 120 10 顺化镇列四坝村基地3 2 347 120 11 三堡镇宏寺村 2 022 200 12 三堡镇宏寺村 2 022 200 13 三堡镇韩家庄村基地1 1 892 300 14 三堡镇韩家庄村基地1 1 890 300 15 三堡镇韩家庄村基地2 1 922 120 16 三堡镇韩家庄村基地2 1 923 120 17 三堡镇徐家寨村基地1 1 886 100 18 三堡镇徐家寨村基地1 1 890 100 19 三堡镇徐家寨村基地2 1 886 200 20 三堡镇徐家寨村基地2 1 886 200 21 顺化镇曹营村 2 385 300 22 顺化镇曹营村 2 384 300 23 顺化镇下天乐村基地1 2 155 150 24 顺化镇下天乐村基地1 2 155 150 25 顺化镇下天乐村基地2 2 155 100 26 顺化镇下天乐村基地2 2 157 100 27 顺化镇海潮坝 2 896 200 28 顺化镇海潮坝 2 894 200 -
黄芪质量分析实验内容主要包括:采用水溶性浸出物测定法(冷浸法)测定浸出物[3],采用原子吸收分光光度法测定药材重金属铅、镉、铜[3],采用原子荧光分光光度法测定药材重金属砷、汞[4-5],采用高效液相色谱法分别测定黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,方法详见《中国药典》2015年版一部[6]。
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土壤因子分析方法主要参照《土壤农业化学分析方法》[7],实验内容包括采用电位法测定土壤pH值,采用灼烧法测定土壤有机质含量,采用浸提-质量法测定土壤可溶盐总量,采用开氏消煮法(H2SO4-K2SO4-CuSO4-硒粉作为消煮剂)测定土壤全氮含量[8],采用钼锑抗比色法测定土壤全磷及有机磷含量,采用四苯硼钠比浊法测定土壤速效钾含量[9]。此外,土壤重金属元素含量测定采用微波消解法制备供试品溶液[10],土壤重金属铅、镉、铜采用原子吸收分光光度法测定[3],砷、汞采用原子荧光光度法测定[4-5]。
2.1. 样品来源
2.2. 黄芪质量分析方法
2.3. 土壤因子分析方法
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黄芪质量测定结果见表2。
编号 来源 浸出物(%) 主成分含量(%) 重金属含量(mg/kg) 黄芪甲苷 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 铅 镉 砷 汞 铜 1 王家庄村1 42.8 0.086 0.039 0.987 0.021 0.272 6 0.003 2 11.35 2 王家庄村2 40.0 0.082 0.040 0.656 0.013 0.245 0 0.003 9 12.61 3 张宋村1 42.9 0.087 0.042 0.697 0.016 0.242 1 0.002 3 12.70 4 张宋村2 44.7 0.076 0.044 0.636 0.023 0.231 4 0.002 4 10.98 5 列四坝村1 40.9 0.085 0.039 0.745 0.013 0.235 7 0.006 3 10.43 6 列四坝村2 43.9 0.049 0.033 0.750 0.021 0.333 7 0.004 8 13.71 7 列四坝村3 47.1 0.051 0.031 0.428 0.019 0.339 3 0.003 2 9.94 8 列四坝村4 49.6 0.051 0.033 0.872 0.015 0.333 5 0.012 0 13.74 9 列四坝村5 42.7 0.050 0.033 0.692 0.019 0.332 5 0.008 9 10.34 10 列四坝村6 44.5 0.050 0.034 0.180 0.026 0.333 2 0.004 0 11.06 11 宏寺村1 39.4 0.076 0.032 0.289 0.031 0.574 2 0.004 8 14.55 12 宏寺村2 40.0 0.076 0.030 0.195 0.028 0.574 5 0.003 2 14.63 13 韩家庄村1 43.3 0.075 0.030 0.823 0.025 0.575 6 0.003 3 15.43 14 韩家庄村2 41.1 0.075 0.032 0.435 0.029 0.580 6 0.003 3 14.19 15 韩家庄村3 42.4 0.076 0.029 0.483 0.037 0.575 8 0.003 3 11.02 16 韩家庄村4 40.4 0.076 0.030 0.680 0.024 0.561 7 0.012 4 11.48 17 徐家寨村1 42.2 0.084 0.025 0.743 0.028 0.405 2 0.008 0 11.37 18 徐家寨村2 39.3 0.087 0.026 0.729 0.017 0.394 2 0.011 2 14.09 19 徐家寨村3 40.0 0.085 0.025 0.262 0.019 0.385 0 0.014 3 12.60 20 徐家寨村4 43.0 0.085 0.025 0.522 0.023 0.398 6 0.009 9 14.00 21 曹营村1 46.0 0.099 0.028 0.086 0.015 0.204 4 0.005 8 13.10 22 曹营村2 48.2 0.098 0.029 0.348 0.023 0.190 9 0.004 2 13.15 23 下天乐村1 49.7 0.101 0.029 0.957 0.007 0.204 9 0.005 8 11.61 24 下天乐村2 49.1 0.066 0.025 0.808 0.043 0.197 0 0.005 7 11.86 25 下天乐村3 48.8 0.067 0.025 0.657 0.040 0.184 9 0.005 8 12.55 26 下天乐村4 46.5 0.066 0.025 0.542 0.019 0.185 4 0.006 7 14.80 27 海潮坝1 43.9 0.055 0.026 0.606 0.022 0.177 0 0.005 0 12.96 28 海潮坝2 42.2 0.055 0.026 0.583 0.024 0.187 9 0.005 8 14.66 由表2数据可知,28批黄芪药材的浸出物含量为39.3%~49.7%,黄芪甲苷含量为 0.049% ~0.101%,毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为 0.025%~0.044%。根据《中国药典》2015年版一部[6]的规定:黄芪浸出物不得少于17.0%;含黄芪甲苷不得少于0.040 %;含毛蕊异黄酮葡萄糖苷不得少于0.020%。可见,28批黄芪样品的浸出物、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量均高于药典标准规定。
28批黄芪药材中重金属铅含量为0.086~0.987 mg/kg,镉含量为0.007~0.043 mg/kg,铜含量为9.94~15.43 mg/kg,砷含量为0.177 0~0.580 6 mg/kg,汞含量为0.002 3~0.014 3 mg/kg。参照《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》[11]及《中国药典》2015年版一部[6]的重金属限度规定:铅≤5.0 mg/kg,镉≤0.3 mg/kg,砷≤2.0 mg/kg,汞≤0.2 mg/kg,铜≤20.0 mg/kg,重金属总量≤20.0 mg/kg。可见,28批黄芪样品中重金属铅、镉、砷、汞、铜的含量均在规定限度以内。
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土壤因子测定结果见表3。
编号 来源 pH 土壤肥力因子 (mg/kg) 重金属含量(mg/kg) 有机质(%) 全氮(%) 可溶盐 全磷 有机磷 速效钾 铅 镉 砷 汞 铜 1 王家庄村1 7.596 4.33 0.178 1 490 968.32 47.52 275.26 22.69 0.312 1.087 2 0.065 8 60.33 2 王家庄村2 7.678 3.59 0.187 1 480 947.06 96.08 276.99 21.38 0.331 1.579 4 0.074 2 32.11 3 张宋村1 7.521 4.06 0.182 1 540 902.97 56.97 272.66 24.38 0.485 1.539 1 0.065 8 39.87 4 张宋村2 7.539 4.71 0.182 1 240 1 007.62 159.54 268.75 29.42 0.398 1.186 5 0.066 6 53.17 5 列四坝村1 7.549 3.38 0.187 1 740 943.14 137.37 277.30 20.15 0.394 1.142 7 0.100 5 56.80 6 列四坝村2 7.761 2.29 0.068 1 720 1 021.15 310.26 96.76 28.49 0.352 1.317 6 0.097 7 72.33 7 列四坝村3 7.708 2.21 0.057 3 110 836.19 240.07 97.85 16.62 0.403 1.503 6 0.100 5 83.38 8 列四坝村4 7.736 2.85 0.086 1 750 762.26 66.19 96.38 27.69 0.323 1.370 8 0.067 7 96.70 9 列四坝村5 7.712 2.00 0.072 1 730 746.67 184.40 100.16 20.14 0.290 1.473 7 0.063 7 98.09 10 列四坝村6 7.598 2.57 0.079 1 640 901.92 316.88 95.80 29.59 0.338 1.569 1 0.071 9 109.8 11 宏寺村1 7.693 2.80 0.165 740 910.48 104.76 281.28 23.59 0.321 1.543 2 0.095 2 96.14 12 宏寺村2 7.715 3.43 0.185 2 170 1 040.00 140.00 271.18 19.07 0.192 1.538 0 0.078 0 102.5 13 韩家庄村1 7.790 3.77 0.122 1 060 953.40 104.34 262.92 28.23 0.328 1.525 6 0.072 1 93.25 14 韩家庄村2 7.697 3.73 0.181 700 1 011.88 84.26 302.88 18.89 0.218 1.490 7 0.112 6 106.9 15 韩家庄村3 7.623 4.51 0.185 910 109 4.23 35.41 271.39 23.92 0.447 1.495 2 0.112 0 112.6 16 韩家庄村4 7.867 3.84 0.183 1 140 1 073.58 123.58 273.69 19.09 0.185 1.440 3 0.071 7 107.4 17 徐家寨村1 7.527 2.03 0.108 1 470 856.86 124.17 104.98 25.71 0.350 1.417 5 0.069 1 89.17 18 徐家寨村2 7.757 3.91 0.099 540 843.40 205.77 107.86 20.22 0.291 1.403 6 0.069 5 101.8 19 徐家寨村3 7.842 3.87 0.104 730 769.52 68.57 106.03 35.36 0.306 1.369 8 0.074 0 101.4 20 徐家寨村4 7.762 3.57 0.096 1 090 745.63 87.14 104.68 17.93 0.407 1.505 0 0.066 1 109.0 21 曹营村1 7.520 3.20 0.147 750 1 041.18 68.63 209.19 26.03 0.443 1.456 7 0.071 8 103.6 22 曹营村2 7.723 5.25 0.153 1 050 1 066.67 76.47 226.00 22.77 0.283 1.358 1 0.099 6 109.8 23 下天乐村1 7.828 3.28 0.147 730 998.10 145.27 211.06 16.89 0.358 1.384 4 0.100 2 108.9 24 下天乐村2 7.761 4.04 0.149 690 1 400.00 374.26 146.17 17.94 0.440 1.480 4 0.072 1 110.9 25 下天乐村3 7.669 4.38 0.144 780 1 650.98 786.22 144.19 17.89 0.381 2.599 4 0.072 4 109.0 26 下天乐村4 7.662 2.91 0.143 900 1 465.35 553.58 142.82 19.72 0.446 2.313 6 0.071 1 119.7 27 海潮坝1 7.801 4.25 0.144 760 1 007.62 69.62 93.97 21.58 0.460 2.323 9 0.072 0 132.7 28 海潮坝2 7.880 4.57 0.156 340 984.47 173.15 90.37 21.11 0.447 2.340 4 0.071 9 143.8 28份土壤样品的重金属测定结果为:铅含量为16.62~35.36 mg/kg,镉含量为0.185~0.485 mg/kg,砷含量为1.0872~2.599 4 mg/kg,汞含量为0.063 7~0.112 6 mg/kg,铜含量为32.11~143.8 mg/kg。《土壤环境质量 农用地土壤污染风险管控标准(试行)》中规定农用地土壤重金属污染风险筛选值[12]:铅为170 mg/kg,镉为0.6 mg/kg,砷为25 mg/kg,汞为3.4 mg/kg,铜为100 mg/kg。可见,28份黄芪根基土壤样品中重金属铅、镉、砷、汞的含量均低于农用地土壤污染风险筛选值,但其中16份土壤样品的铜含量高于其筛选值。
基于农用地土壤污染风险管控标准中管制值项目不包括铜[12],并结合28批黄芪药材重金属的测定结果综合分析,可认为土壤受重金属污染的风险低,一般情况下可以不对民乐县域内黄芪药材的生长土壤进行重金属监测。
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运用SPSS19.0软件分别计算28批黄芪的浸出物、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量与各土壤因子的相关系数[13],结果见表4。
成分 pH值 可溶盐 有机质 全氮 全磷 有机磷 速效钾 浸出物 −0.017 0.046 0.015 −0.371 0.258 0.205 −0.386* 黄芪甲苷 −0.105 −0.297 0.248 0.255 0.019 −0.310 0.388* 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 −0.408* 0.592** −0.105 0.300 −0.161 −0.151 0.386* *P<0.05,呈显著相关;**P<0.01,呈极显著相关 由表4可知,浸出物与速效钾呈显著负相关,即浸出物随土壤速效钾含量的增加而降低;黄芪甲苷与速效钾呈显著正相关,即黄芪甲苷随土壤速效钾含量的增加而增加;毛蕊异黄酮葡萄糖苷与可溶盐呈极显著正相关,与速效钾呈显著正相关,与pH值呈显著负相关,即毛蕊异黄酮葡萄糖苷随土壤可溶盐和速效钾含量的增加而增加,随土壤pH值的增大而降低。浸出物、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷与测定的其他土壤因子无显著相关性。
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对黄芪质量和土壤因子数据进行灰色关联度分析[14-15],结果见表5。
成分 pH (r1) 可溶盐(r2) 有机质(r3) 全氮(r4) 全磷(r5) 有机磷(r6) 速效钾(r7) 浸出物 0.918 7 0.667 4 0.776 6 0.740 0 0.860 1 0.602 1 0.625 4 黄芪甲苷 0.981 8 0.675 5 0.799 9 0.749 7 0.858 5 0.599 9 0.637 6 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 0.848 2 0.740 4 0.774 0 0.774 0 0.800 4 0.598 2 0.718 1 由表5可知,从浸出物和黄芪甲苷的角度考虑,7个土壤因子按关联度大小排序均为:r1>r5>r3>r4>r2>r7>r6,结果表明土壤pH是影响黄芪浸出物和黄芪甲苷含量的重要因子,其次是全磷、有机质和全氮;从毛蕊异黄酮葡萄糖苷的角度考虑,7个土壤因子按关联度大小排序为:r1>r5>r3=r4>r2>r7>r6,结果表明土壤pH值是影响毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的重要因子,其次是全磷、有机质和全氮。