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景天止痛膏质量标准研究

胡丹 尹明 王习文 曹红 张贵英 苏传洋 张帅

杨彬, 李鑫, 韦平, 褚征. 门诊药房发药辅助系统的设计与应用[J]. 药学实践与服务, 2023, 41(6): 389-392. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202106003
引用本文: 胡丹, 尹明, 王习文, 曹红, 张贵英, 苏传洋, 张帅. 景天止痛膏质量标准研究[J]. 药学实践与服务, 2022, 40(2): 157-160, 170. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202109050
YANG Bin, LI Xin, WEI Ping, CHU Zheng. Design and application of auxiliary system for drug distribution in outpatient pharmacy[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2023, 41(6): 389-392. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202106003
Citation: HU Dan, YIN Ming, WANG Xiwen, CAO Hong, ZHANG Guiying, SU Chuanyang, ZHANG Shuai. Study on quality standard of Jingtian Zhitong cream[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2022, 40(2): 157-160, 170. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202109050

景天止痛膏质量标准研究

doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202109050
基金项目: 全军医疗机构制剂标准提高重点课题(13ZJZ16)
详细信息
    作者简介:

    胡丹,硕士,副主任药师,研究方向:中药质量标准,Email:hudan1006@sina.com

    通讯作者: 尹明,博士,主任医师,副教授,研究方向:老年多器官功能障碍综合症的急救,Email:ym301@163.com
  • 中图分类号: R917

Study on quality standard of Jingtian Zhitong cream

  • 摘要:   目的  修订景天止痛膏质量标准中的测定方法。  方法  采用薄层色谱法(TLC)对当归、川芎、元胡、三七总皂苷进行定性鉴别,应用高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量。  结果  TLC法鉴别专属性强,分离度好;三七皂苷R1在0.1604~2.0050μg (r=0.999)、人参皂苷Rg1在0.8003~10.0035μg (r=1.000)、人参皂苷Rb1在0.6182~7.7275μg (r=1.000) 范围内呈良好的线性关系,加样回收率分别为101. 43% 、98.75% 、100. 95% ,相对标准偏差(RSD)分别为2.56% 、2.71% 、2.75%。  结论  本方法准确可靠、灵敏度高,可用于景天止痛膏的质量控制。
  • 药品的调剂发放是门诊药房药师工作中非常重要的组成部分,门诊药师的药学服务工作也都围绕着药品的调剂发放展开。随着医药科技发展,门诊处方量不断增加,以及药品集中采购带来的药品更替增加,都给门诊药品的调剂发放带来了巨大的压力。

    笔者所在医院是一所大型综合性医院,工作日平均门诊量在10 000人次左右,日均处方4 000张以上,每个发药窗口日均处方量500张以上,窗口药师工作压力巨大,极易出错。“军卫一号”发药系统自1997年在本院开始使用至今,软件老旧,功能不足。为适应我院的实际情况,提高工作效率,改善工作质量,特开发了“门诊发药辅助系统”。该系统充分利用各类条形码便捷输入的特点,在药品核对、处方权管理、效期管理、用药交待等多个环节辅助药师工作,可以有效降低差错,提高效率,增强药品管控能力。现将本系统的设计与使用情况做简要介绍。

    以医院信息系统(HIS)为数据基础,结合MS SqlServer 2008数据库管理系统作为数据储存平台,以Windows XP以上操作系统为开发及运行平台,Delphi和DotNet作为开发语言,构建了客户端(C/S)形式的应用程序。

    系统主要分后台数据维护和前台发药辅助两部分。后台数据维护部分负责对条形码、处方权、效期等提示信息进行维护,前台发药辅助部分提供即时的信息显示和查询功能。详细结构见图1

    图  1  “门诊发药辅助系统”结构图

    条形码识别是该系统构建的核心。药品包装上的条形码一般有商品码和监管码两种[1]。2012年开始国家提出了对药品电子监管信息平台的建设工作,2016年国家又出台了《关于推动食品药品生产经营者完善追溯体系的意见》,虽然药品追溯体系的建立一波三折,但是至今国家药品监管码仍然已经覆盖了超过80%的中国药品企业和95%的国家重点关注品种[2]。本系统采用商品码和监管码并行查询的方式,对患者、处方和药品进行识别。

    条码信息、处方权信息和效期信息统一由数据维护程序录入系统。①药师通过程序的条码录入模块查询HIS储存的药品信息,然后扫描药盒上的商品码和监管码,把条码与相应的药品匹配。②负责管理处方权登记的药师可通过程序的处方权管理模块搜索HIS中储存的医生信息,在程序中设置医生所拥有的处方权限。③负责库存管理药师可通过程序的效期管理模块查询药品信息,并对药品的效期信息进行维护。

    用药交待模块的数据直接从门诊用药咨询登记系统读取,平时由门诊咨询药师在咨询登记过程中根据咨询的情况随时维护,保证资料库中有最新、最简洁、最常用的药品信息直接为前台药师提供帮助。

    由于原“军卫一号”发药系统的源代码无法修改,并且在现有的工作条件下,窗口药师工作繁忙,无法抽出时间进行过多的输入操作,所以系统把患者ID、条形码监管码等信息输入统一在一个输入口,通过系统后台监控药师扫码过程,做到功能无缝切换。药师只需扫描一次条码,系统即可查询并显示该患者当日所有就诊科室开具的多个处方信息。

    2.2.1   药品核对

    药品核对部分的工作流程见图2

    图  2  药品核对部分工作流程

    原有的发药流程中,药师只能依据经验,逐一核对患者的取药单据、电脑信息、处方和药品。引入新的“门诊发药辅助系统”后,药师只需扫描患者手中收据或者取药凭条上包含患者ID号信息的条码,发药系统搜索定位到该患者处方。此时辅助系统接收到扫描信息,自动完成输入焦点切换、查询并显示处方明细等一系列操作。药师直接扫描药品包装上的商品码或监管码进行药品核对。对于品种正确的药品,系统弹出显示框放大该药品信息,药师进一步核对药品数量。如果处方中没有该药品,则系统弹出提示告知药师确认。以往的药品核对工具只能对药品品种进行核对,缺乏对药品数量的敏感性[3]。该系统通过放大及颜色刺激的方式对数量做出提示,既可避免逐盒扫描药品对发药速度的影响,又可在一定程度上降低人工核对导致的数量差错。

    显示的处方明细中以不同的字体颜色和底色向药师提示不同的情况。背景灰色表示该药品未录入条码,背景黄色表示该药品已扫码发放,红色字体表示该药品信息有异常。协助药师快速了解处方药品情况,提高发药效率。

    2.2.2   处方权管理

    处方权限的提示集成在扫码显示的处方明细界面中。显示的信息包括了医生的姓名及所在科室。文字为绿色则提示该医生有麻精药品处方权限,可以开具特殊药品处方,进一步点击医生姓名可显示HIS中储存的医生签名图片;文字为红色则提示该医生没有进行过麻精药品处方权限登记,如果开具特殊药品,需要有权限的医师在处方上再次签字确认。由于门诊医生人数众多,流动量大,该功能可帮助药师快速确定医生权限,不需要查阅处方权登记本,把更多精力放在对处方合理性的审核上。

    2.2.3   效期管理

    药品的效期提示同样集成在处方明细界面中,直接以颜色作为标识。如果辅助系统查询到处方中的某种药品包含近效期药品,则以醒目的绿色字体提示药师,药师需要仔细核对药品每个最小包装,确认是否可以正常发放。

    2.2.4   用药交待

    药品辅助咨询的信息以提示框的形式在处方明细界面供药师查询显示。药品信息以蓝色字体显示,则提示该药品包含提示信息。药师双击该药名即可弹出提示框显示该药品的储存方式、注意事项、用法用量、相互作用等需要提示患者的信息或者患者经常提问的信息,进一步强化药师的药学服务能力。

    为考察发药辅助系统的实际应用效果,并对系统功能的进一步改进提供帮助,笔者针对门诊药师重点关注的调配差错、发药效率和对药师的影响等方面进行调查分析。

    门诊药房作为与患者直接沟通的窗口,差错的出现对于患者影响的意义巨大,直接影响患者是否能安全有效的使用药物,影响患者对医院药学服务的信任程度。但是由于药品数量多,药师工作压力大,且存在药名相似、包装相似、一品多规等多种干扰因素,总是难以避免产生人为的调剂差错。据统计,美国每年用药差错中58%是由于药名、包装相似引起的品种差错[4],国内的报告中品种差错也达到了40%左右[5-6]。使用该系统后,对于品种差错,系统会自动提示错误,相当于在发药环节增加了计算机核对步骤,由原来的双核对增加到了三核对,同时高亮的已发药品显示还能帮助药师检查是否有漏发、多发的情况,可以有效降低药师发药的差错。在辅助系统稳定工作1年后,笔者对系统使用前后1年内的发药差错情况进行统计分析,差错数据来源除由患者找回的发药差错外,还包括在盘点过程中发现账物不符并排除其他情况后推断为发药差错的差错。其中数量差错包括多发、少发、漏发等情况,品种差错包括由于药名相似、剂型相似或包装相似等引起的差错,其他为患者拿错,遗落等原因引起的差错,所有差错均是经核实并登记的发药差错。结果如表1

    表  1  发药辅助系统使用前后发药差错对比
    差错类型系统使用前系统使用后
    例数占比(%)例数占比(%)
    数量差错41491560
    品种差错3339416
    其他1012624
    总计8410025100
    总差错率(‰)(差错数/年处方数)0.1070.027
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    启用发药辅助系统后,药师在发药过程中增加了扫码环节,单个药品核对用时有所增加。但经过笔者对所在单位门诊发药高峰时段(10:00-11:30)使用发药辅助系统前后单个患者平均取药时间进行统计。结果显示使用发药辅助系统后,患者取药消耗的时间反而有所减少。高峰时段患者总取药时间中位数由原来的8 min 52 s,缩短到了现在的6 min 21 s。综合考虑药师发药时的各种情况,在当前调配量过剩的情况下,虽然发药扫码过程消耗了额外的时间,但是药师在系统的辅助下,只要逐品种扫码发放药品,核对数量,不需要额外花精力去确认药品是否漏发或发重,可以更快的核对处方、核对药品,在患者多科室看病,开具药品品种较多时,效果尤其明显。处方权提示和用药交代提供的内容帮助药师更快的应对发药过程中出现的情况,有效的提高了总体工作效率。

    通过对门诊药师开展系统使用情况的问题调研,反馈的情况统计如表2

    表  2  发药辅助系统药师反馈意见汇总(n=32)
    药师反馈意见赞同人数赞同人数占比(%)
    系统可减少差错3094
    系统可提高效率2372
    有助于增强事件处理能力2063
    增加了工作量39
    系统有助于药师工作32100
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    药师普遍认为该辅助系统有助于减少差错、降低发药药师的工作压力。通过对反馈问题的深入了解,主要不认可的问题在于部分年龄比较大的药师,经验丰富,工作更依赖于自身经验,对于新引入的计算机软件有一定的排斥心理,需要更多的时间逐渐适应系统操作。另外有个别药品外包装既没有商品码,也没有监管码,无法识别,只能人工核对药品信息。

    2015年国家食药总局就要求“2016年1月1日后生产的药品制剂应做到全部赋码”,2019年4月19日,国家药品监督管理局正式发布了《药品信息化追溯体系建设指导》和《药品追溯码编码要求》两项药品信息化追溯体系标准,编码规则确定了20位溯源码前7位为药品标识码或者符合ISO相关国际标准,但至今仍有部分药品既无监管码也没有商品码。笔者对所在医院门诊药房现有919种药品进行了统计,有58%的药品包装有商品码,有73%的药品包装印有监管码,条码总计覆盖了79%的药品。按药品消耗量计算,可扫码药品占门诊总发药量的93.8%。不能扫码的药品主要为医院制剂、针剂和部分瓶装普药。如果把这些药品全部纳入扫码,需要额外做大量的工作。对于医院制剂,可以与制剂部门沟通在药品包装上加印自制的条形码,其他药品需要在实际工作中仔细核对,进一步结合工作研究出既不影响效率又能提高准确率的方案。

    应用该发药辅助系统后,总的差错数量大幅减少,数量差错也有明显减少,但品种差错仍然存在。主要原因是虽然辅助系统提供了多一层核对,但是药师过于依赖该系统,弱化了自身的核对,造成错误。同时高强度的工作也是导致药师注意力不集中,出现发药差错的影响因素。

    门诊发药辅助系统功能涵盖了药师发药工作的多个环节,功能全面。系统以发药核对为核心功能,既整合了处方权管理、效期管理和药学服务等功能模块,同时各个模块之间又相对独立,可根据需求逐步添加。处方权管理模块在麻精药品管理中引入了信息化控制,能够进一步规范麻精药品的使用,确保制度落实。咨询辅助模块在协助药师回答患者问题的同时,也强化了药师的业务能力,有助于提高药师地位。药师咨询能力的提升,也有助于减少医患纠纷的发生[7]

    市售的大型发药系统虽然发药准确率可达到万分之二,但是设备引进及维护费用巨大,且对药房环境条件、药品剂型、包装等有诸多限制[8]。整个扫码发药过程中只需要在每个窗口添加条码扫描设备,维护简单,无需过多的硬件或资金投入。该程序的使用,用较低的成本优化了药学服务,提高了发药准确率,对药学服务的发展具有重要意义。

  • 图  1  当归、川芎薄层色谱图

    注:1.缺当归和川芎阴性对照; 2.当归对照药材;3.川芎对照药材;4~6.三批样品

    图  2  元胡薄层色谱图

    注:1.延胡索乙素;2~4.三批样品;5.元胡对照药材;6.阴性对照

    图  3  三七总皂苷薄层色谱图

    注:1~3.三批样品; 4.三七总皂苷;5.阴性对照

    图  4  景天止痛膏HPLC图

    注:A.对照品溶液;B.供试品溶液;C. 阴性对照溶液1.三七皂苷R1;2.人参皂苷Rg1;3.人参皂苷Rb1

    表  1  景天止痛膏加样回收率试验结果(n=6)

    主成分称样量(g)样品量(mg)加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)平均值(%)RSD(%)
    三七皂苷R11.01300.39820.39000.7980102.51101.432.56
    1.06760.41960.39000.8240103.69
    1.02100.40120.39000.788099.18
    1.05900.41620.39000.796097.38
    1.00040.39640.39000.7940101.95
    1.00020.39300.39000.7980103.85
    人参皂苷Rg11.01303.97704.40008.300098.2598.752.71
    1.06764.19144.40008.524098.47
    1.02104.00844.40008.354098.76
    1.05904.15764.40008.7260103.83
    1.00043.92764.40008.202097.15
    1.00023.92684.40008.154096.07
    人参皂苷Rb11.01302.49603.24005.7900101.67100.952.75
    1.06762.63063.24005.9760103.25
    1.02102.51583.24005.8920104.20
    1.05902.60943.24005.8840101.07
    1.00042.46503.24005.662098.67
    1.00022.46443.24005.602096.84
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    表  2  景天止痛膏主成分含量的测定结果(n=3)

    批号三七皂苷R1
    (mg/g)
    人参皂苷Rg1
    (mg/g)
    人参皂苷Rb1
    (mg/g)
    201402010.3931.9631.232
    201403010.4071.9781.239
    201404010.4211.9971.265
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出版历程
  • 收稿日期:  2021-09-09
  • 修回日期:  2022-01-20
  • 网络出版日期:  2022-03-29
  • 刊出日期:  2022-03-25

景天止痛膏质量标准研究

doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202109050
    基金项目:  全军医疗机构制剂标准提高重点课题(13ZJZ16)
    作者简介:

    胡丹,硕士,副主任药师,研究方向:中药质量标准,Email:hudan1006@sina.com

    通讯作者: 尹明,博士,主任医师,副教授,研究方向:老年多器官功能障碍综合症的急救,Email:ym301@163.com
  • 中图分类号: R917

摘要:   目的  修订景天止痛膏质量标准中的测定方法。  方法  采用薄层色谱法(TLC)对当归、川芎、元胡、三七总皂苷进行定性鉴别,应用高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量。  结果  TLC法鉴别专属性强,分离度好;三七皂苷R1在0.1604~2.0050μg (r=0.999)、人参皂苷Rg1在0.8003~10.0035μg (r=1.000)、人参皂苷Rb1在0.6182~7.7275μg (r=1.000) 范围内呈良好的线性关系,加样回收率分别为101. 43% 、98.75% 、100. 95% ,相对标准偏差(RSD)分别为2.56% 、2.71% 、2.75%。  结论  本方法准确可靠、灵敏度高,可用于景天止痛膏的质量控制。

English Abstract

杨彬, 李鑫, 韦平, 褚征. 门诊药房发药辅助系统的设计与应用[J]. 药学实践与服务, 2023, 41(6): 389-392. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202106003
引用本文: 胡丹, 尹明, 王习文, 曹红, 张贵英, 苏传洋, 张帅. 景天止痛膏质量标准研究[J]. 药学实践与服务, 2022, 40(2): 157-160, 170. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202109050
YANG Bin, LI Xin, WEI Ping, CHU Zheng. Design and application of auxiliary system for drug distribution in outpatient pharmacy[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2023, 41(6): 389-392. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202106003
Citation: HU Dan, YIN Ming, WANG Xiwen, CAO Hong, ZHANG Guiying, SU Chuanyang, ZHANG Shuai. Study on quality standard of Jingtian Zhitong cream[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2022, 40(2): 157-160, 170. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202109050
  • 景天止痛膏是由肉桂、三七、当归、元胡、猪牙皂等十四味中药组成的复方制剂,具有活血化淤、消肿止痛功能,主治骨质增生、慢性腰腿痛等症。由于该制剂标准中仅包含一个当归薄层色谱鉴别,且无定量测定方法,不能全面控制制剂质量。根据全军医疗机构制剂标准提高课题要求,在原有质量标准基础上,增加了当归、川芎、三七总皂苷、元胡的薄层鉴别,同时采用高效液相色谱法,测定景天止痛膏中所含三七皂苷R1、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1总量的含量测定方法,以此为该制剂的质量控制提供依据。

    • LC-20AD岛津高效液相色谱仪(日本岛津);紫外检测器;对照品:三七皂苷R1(批号:110745-200617)、人参皂苷Rg1(批号:111537-201204)、人参皂苷Rb1(批号:111537-201204)均购自中国食品药品检定研究院;景天止痛膏(规格:10cm×6.5cm,批号:20140201、20140301、20140401),由原南京政治学院门诊部提供;乙腈为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯。

    • 取本品1片,除去盖衬,剪成小块,置锥形瓶中,加乙醇50 ml,加热回流1 h,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇2 ml溶解,作为供试品溶液。另取当归、川芎对照药材适量,加乙醇分别制成每1 ml含2 mg的对照药材溶液。按照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验,吸取上述两种溶液各5 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-乙酸乙酯 (9∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性试验样品未见干扰,见图1

      图  1  当归、川芎薄层色谱图

    • 取本品2片,除去盖衬,剪成小块,置锥形瓶中,加70 %乙醇50 ml,加热回流2 h,滤过,滤液蒸干,残渣加10 ml水溶解,用1 %盐酸调pH至2~3,滤过,滤液用浓氨水调pH至9~10,用氯仿萃取3次,合并氯仿液,蒸干,残渣加甲醇1 ml使溶解。另取延胡索乙素加甲醇制成每1ml含0.5mg的对照品溶液。取元胡1 g,照供试品方法提取,加甲醇制成每1 ml含1 mg的对照药材溶液。按照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验,吸取上述两种溶液各5 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-冰醋酸-水 (10∶3∶5)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置碘缸中熏至斑点清晰后取出,挥尽板上吸附的碘后,置紫外光灯(365 nm)下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点。阴性试验样品未见干扰,见图2

      图  2  元胡薄层色谱图

    • 取本品2 g,除去盖衬,剪成小块,置锥形瓶中,加水5 ml,再加入水饱和后的正丁醇30 ml,振摇,静置过夜,滤过,滤液加3倍量以正丁醇饱和的水,摇匀,放置使分层,取正丁醇层,蒸干,残渣加甲醇1 ml使溶解。另取三七总皂苷,加甲醇制成每1 ml含0.5 mg的溶液。按照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水 (15∶40∶22∶10)10 ℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10 %硫酸乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;置紫外光灯(365nm)下检视,显相同的荧光斑点。阴性试验样品未见干扰,见图3

      图  3  三七总皂苷薄层色谱图

    • 色谱柱:Promosil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);以乙腈为流动相A,水为流动相B,梯度洗脱:0~5 min,23% A;5~68 min,23%~33% A。柱温为35 ℃,流速为1.0 ml/min;检测波长为203 nm;进样体积为10 μl。在此条件下,样品中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1与相邻峰达到良好分离,见图4

      图  4  景天止痛膏HPLC图

    • 取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 ml中分别含0.08、0.4、0.36 mg的混合溶液,即得。

    • 取本品约2 g,除去盖衬,剪成小块,精密称定,置具塞锥形瓶中,加入甲醇50 ml,加热回流2 h,摇匀,滤过。再用15 ml甲醇荡洗锥形瓶,滤过,合并滤液并蒸干,残渣加水15 ml,以水饱和的正丁醇振摇提取4次,每次20 ml,合并正丁醇液,用氨试液洗涤2次,每次20 ml,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至10 ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

    • 按处方量配制不含三七药材的阴性样品,按供试品溶液方法制备阴性对照溶液。

    • 取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液,按“2.2.1”项下色谱条件进样分析,阴性对照液中色谱峰对测定无干扰(见图4)。

    • 取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品适量,加甲醇溶解制成每1 ml 分别含0.8019、4.0014、3.0913 mg的混合对照品储备溶液6,将溶液6稀释如下: 0.2 ml→10 ml、0.5 ml→10 ml、1 ml→10 ml、2 ml→10 ml、2.5 ml→10 ml作为对照品溶液1~5,精密吸取上述对照品溶液1~5各10μl,注入液相色谱仪,按“2.2.1”项下色谱条件测定峰面积,以进样量(μg)为横坐标(X),峰面积(Y)为纵坐标,进行线性回归,分别得到三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的回归方程:

      Y=30339X−874.4,r=0.999

      Y=22431X−0.325,r=1.000

      Y=27695X+699.8,r=1.000

      结果表明,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1分别在0.1604~2.005 µg、0.8003~10.0035 µg和0.6182~7.7275 µg范围内呈良好的线性关系。

    • 精密吸取“2.2.2”项下对照品溶液10 µl,在上述色谱条件下,连续进样6次。结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1峰面积的RSD值依次为1.23%、1.54%、1.04%(n=6),表明仪器精密度良好。

    • 取同一批号的景天止痛膏(批号20140201)按“2.2.3”项下方法平行制备6份供试品溶液,按上述色谱条件,结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1峰面积的RSD值依次为2.86%、2.49%、2.75%,表明此法重现性良好。

    • 取同一批号的景天止痛膏(批号20140201)按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液1份,精密吸取10 µl, 分别在0、2、5、9、12、24 h进样,测定。结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1峰面积的RSD值依次为1.85%、0.77%、1.20%,表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

    • 取同一批号的景天止痛膏(批号20140201)1.0g,精密称定,分别精密加入混合对照品溶液(三七皂苷R10.0078 mg/ml、人参皂苷Rg10.088 mg/ml、人参皂苷Rb10.0648 mg/ml)50 ml,按“2.2.3项下方法平行制备6份供试品溶液,按“2.2.1项下色谱条件测定,结果见表1

      表 1  景天止痛膏加样回收率试验结果(n=6)

      主成分称样量(g)样品量(mg)加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)平均值(%)RSD(%)
      三七皂苷R11.01300.39820.39000.7980102.51101.432.56
      1.06760.41960.39000.8240103.69
      1.02100.40120.39000.788099.18
      1.05900.41620.39000.796097.38
      1.00040.39640.39000.7940101.95
      1.00020.39300.39000.7980103.85
      人参皂苷Rg11.01303.97704.40008.300098.2598.752.71
      1.06764.19144.40008.524098.47
      1.02104.00844.40008.354098.76
      1.05904.15764.40008.7260103.83
      1.00043.92764.40008.202097.15
      1.00023.92684.40008.154096.07
      人参皂苷Rb11.01302.49603.24005.7900101.67100.952.75
      1.06762.63063.24005.9760103.25
      1.02102.51583.24005.8920104.20
      1.05902.60943.24005.8840101.07
      1.00042.46503.24005.662098.67
      1.00022.46443.24005.602096.84
    • 按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液,按“2.2.1”项下色谱条件测定3批样品,结果见表2

    • 三七总皂苷为三七药材的主成分,参照2020版《中国药典》[1],以三七药材方法项下紫外吸收203 nm作为最大吸收。

    • 分别取待测样品1、2、3 g,加入不同浓度乙醇、甲醇,回流1、2、3 h和冷浸24 h,采用氨试液洗涤样品等方法提取样品。结果表明,最终选择取样量为2 g,甲醇为溶剂,氨试液洗涤,并按照正文的含量测定项下方法进行测定提取较完全。

    • 按照“2.2.3”项下供试品溶液的制备,分别在不同柱温30、35、40℃,不同梯度流动相比例条件(0~5 min,23 % A;5~63 min,23%~34 % A与0~5 min,23 % A;5~68 min,23%~33 % A)下,不同色谱柱InertSustainC18 (150 mm×4.6 mm, 5 μm)与Promosil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),测定三七总皂苷含量。在各试验条件下,待测成分的分离较好,测定结果基本一致,耐用性良好。

    •   建立景天止痛膏制剂中当归、川芎、元胡、三七总皂苷的薄层色谱鉴别方法,拟增加肉桂的薄层实验中,因存在阴性试验样品有干扰的问题,故未列入本文。对TLC方法,分别从温度(10℃和35℃)、相对湿度(42%和88%)以及不同硅胶板(国产和进口)等方面进行考察。在各试验条件下,鉴别结果 不受温度、相对湿度和不同硅胶板等条件改变的影响。说明本文所建立的薄层色谱方法作为定性鉴定方法具有很强的适用性。

      表 2  景天止痛膏主成分含量的测定结果(n=3)

      批号三七皂苷R1
      (mg/g)
      人参皂苷Rg1
      (mg/g)
      人参皂苷Rb1
      (mg/g)
      201402010.3931.9631.232
      201403010.4071.9781.239
      201404010.4211.9971.265

      本文采用薄层色谱法鉴别了景天止痛膏制剂中当归、川芎、元胡、三七总皂苷,并建立了高效液相色谱法三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的测定方法。本研究结果,可为该制剂生产过程中的质量控制及检验提供参考,有助于更好把控药品疗效与临床用药安全。

参考文献 (5)

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