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4种猕猴桃药用植物根的显微鉴定研究

吴雅 蒋益萍 张成中 王娜妮 辛海量

孟祥庆, 李丽华, 王宏瑞, 贾丹, 贾敏. 基于网络药理学和反向分子对接的西红花抗肿瘤作用机制研究[J]. 药学实践与服务, 2023, 41(3): 160-167, 196. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202206066
引用本文: 吴雅, 蒋益萍, 张成中, 王娜妮, 辛海量. 4种猕猴桃药用植物根的显微鉴定研究[J]. 药学实践与服务, 2023, 41(7): 433-436. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202111002
MENG Xiangqing, LI Lihua, WANG Hongrui, JIA Dan, JIA Min. Anti-tumor mechanism study on saffron by network pharmacology and reverse molecular docking[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2023, 41(3): 160-167, 196. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202206066
Citation: WU Ya, JIANG Yiping, ZHANG Chengzhong, WANG Nani, XIN Hailiang. Microscopic identification for roots from 4 medicinal plants of Actinidia genus[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2023, 41(7): 433-436. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202111002

4种猕猴桃药用植物根的显微鉴定研究

doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202111002
基金项目: 上海市科委生物医药领域科技支撑项目课题(16401901700);浙江省重点高校建设优势学特色学科重点项目(ZYAOX2018018)
详细信息
    作者简介:

    吴 雅,硕士研究生,Email:1162633313@qq.com

    通讯作者: 蒋益萍,硕士,高级实验师,研究方向:中药鉴定及品质评价,Email:msjyp@163.com辛海量,教授,研究方向:中药资源、品质评价和药理学研究,Email:hailiangxin@163.com

Microscopic identification for roots from 4 medicinal plants of Actinidia genus

  • 摘要:   目的  对大籽猕猴桃、对萼猕猴桃、软枣猕猴桃、中华猕猴桃4种猕猴桃属基植物的根进行显微鉴定研究,为准确鉴定生药提供依据。  方法  采用显微鉴定法对4种猕猴桃药用植物根的粉末进行显微鉴定研究。  结果  以草酸钙簇晶、淀粉粒、导管之形态特征为主要差异点,编制检索表,可用于鉴定此4种药用植物根之间的鉴别。  结论  4种猕猴桃属植物根粉末显微特征可用于鉴定此4种生药,值得进一步研究。
  • 糖尿病为世界三大慢性病之一,据国际糖尿病联盟调查报道,2019年全球约有4.6亿人罹患2型糖尿病(T2DM),中国占30.45%,且全球每年超400万患者死于糖尿病并发症[1]。二甲双胍是临床治疗T2DM首选药物,降血糖效果显著,且具有一定的减重作用[2]。有报道表明[3],肥胖患者内脏脂肪更容易沉积,会降低胰岛素敏感性,影响临床疗效。因此,临床上多用二甲双胍联合其他药物治疗肥胖型T2DM。美国糖尿病学会于2019年在糖尿病诊疗标准中建议有减重需求的T2DM患者可优先考虑胰高血糖素样肽(GLP-1)类似物。利拉鲁肽作为GLP-1类似物日制剂,可促进胰岛细胞再生,保护心血管系统,临床常将其与二甲双胍联合用于治疗肥胖型T2DM[4]。而度拉糖肽是新型GLP-1类似物,每周注射1次,长期治疗肥胖型T2DM患者依从性更高[5]。脂肪组织已被证实可以合成和分泌脂肪因子,参与调控体内糖脂能量,且部分脂肪因子也被证实参与了肥胖人群胰岛素抵抗病理过程,因此研究其治疗过程中的水平变化对评估临床疗效意义重大。但关于度拉糖肽、利拉鲁肽分别联合二甲双胍用于肥胖型T2DM的疗效优劣及对血清脂肪因子的影响鲜有报道。故本研究进行对照分析,从机体代谢、体脂成分、脂肪因子等方面探究度拉糖肽联合二甲双胍的应用价值,以期为今后的临床治疗提供参考依据。

    将2021—2023上海市嘉定区安亭医院符合入组条件的肥胖型T2DM患者200例,按入院顺序排序1~200,采用电脑随机数字表法分组,将患者按1∶1配对原则分配,每位患者赋予1个随机数,随机数序号为1~100为利拉鲁肽组,101~200为度拉糖肽组。纳入条件:①符合《中国2型糖尿病防治指南(2020年版)》[6]中T2DM的相关诊断标准;②体重指数≥28 kg/m2;③精神正常、具有较好沟通能力,可遵医嘱完成治疗;④入组前单用二甲双胍治疗(500 mg/次,2次/d),且效果不佳;⑤对本研究相关药物无过敏;⑥患者或家属签署同意书。排除条件:①1型糖尿病;②近期接受其他减肥方案;③合并严重心脑血管疾病;④脏器功能严重不全;⑤合并肾脏移植、近期胃肠手术史;⑤合并全身感染性疾病、免疫系统疾病。该研究通过本院伦理委员会审批,且遵循《赫尔辛基宣言》中相关原则。2组临床资料相比,均无统计学差异(P>0.05),具有可比性,见表1

    表  1  2组患者临床资料比较(n=100)
    组别 性别[例(%)] 年龄
    ($ \bar x $±s,岁)
    病程
    ($ \bar x $±s,年)
    合并症[例(%)]
    高血压 冠心病 高脂血症 吸烟史 饮酒史
    利拉鲁肽组
    45(45.00) 55(55.00) 59.77±4.65 5.98±1.31 20(20.00) 8(8.00) 7(7.00) 37(37.00) 48(48.00)
    度拉糖肽组
    53(53.00) 47(47.00) 60.18±4.47 6.15±1.38 25(25.00) 11(11.00) 5(5.00) 34(34.00) 53(53.00)
    χ2 1.281 0.636 0.893 0.717 0.523 0.355 0.197 0.500
    P 0.258 0.526 0.373 0.397 0.469 0.552 0.658 0.480
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    2组均给予常规饮食、运动指导。利拉鲁肽组给予利拉鲁肽联合二甲双胍治疗,利拉鲁肽注射液(批准文号:S20160005,Novo Nordisk A/S,规格:3 ml/18 mg)皮下注射,初始剂量0.6 mg/次,根据患者情况增加,最大剂量1.8 mg/次,1次/d;二甲双胍片(批准文号:国药准字H20184066,四川维奥制药有限公司,规格:025 g)口服,500 mg/次,2次/d。度拉糖肽组给予度拉糖肽联合二甲双胍治疗,二甲双胍用法用量同利拉鲁肽组;度拉糖肽注射液(批准文号:S20190021,Vetter Pharma-Fertigung GmbH & Co. KG,规格:1.5 mg/0.5 ml)皮下注射,1.5 mg/次,1次/周。2组均治疗3个月进行指标评价。

    参照相关疗效标准[7],显效:血清空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PBG)恢复正常或较治疗前降低>40%,血红蛋白(HbA1c)恢复正常或较治疗前降低>30%,体质量在标准值上下20%内;有效:血清FBG、2 h PBG较治疗前降低21%~40%,HbAlc较治疗前降低11%~30%,体质量降低>2 kg。无效:未达有效标准或病情加重。有效率=(显效例数+有效例数)/100×100%。

    ①治疗前与治疗3个月,采集静脉血,采用葡萄糖氧化酶法检测FBG、2 h PBG水平,试剂盒购自济南百博生物技术股份有限公司;采用免疫比浊法检测HbA1c水平,试剂盒购自北京利德曼生化股份有限公司;全自动生化分析仪(cobas 8000 c 701型,罗氏诊断公司)检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平。②血清脂联素(adiponectin)、神经肽Q(NPQ)、白脂素(asprosin)、鸢尾素(irisin)水平均采用酶联免疫法进行检测,试剂盒均购自Bio-Rad Laboratories, Inc.。③以体重身体脂肪检测器(HBF-701SH型,欧姆龙公司)记录体脂肪率、体重指数、四肢皮下脂肪率、内脏脂肪指数。④记录治疗期间患者腹部不适、低血糖、呕吐、恶心等不良反应情况。

    采用SPSS25.0进行数据分析,连续变量采用($ \bar x $±s)描述,以独立样本或配对t进行检验;分类变量以[例(%)]描述,以校正或未校正χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

    2组治疗前FBG、2 h PBG、HbAlc、TC、TG水平相比,均无统计学差异(P>0.05)。2组治疗3个月FBG、2 h PBG、HbAlc、TC、TG均较治疗前改善,且度拉糖肽组改善幅度较大(P<0.05),结果见表2

    表  2  2组患者机体代谢指标测定(n=100,$ \bar x $±s
    组别 时间 FBG(cB/mmol·L−1 2 h PBG(cB/mmol·L−1 HbAlc(%) TC(cB/mmol·L−1 TG(cB/mmol·L−1
    利拉鲁肽组 治疗前 9.87±0.73 14.21±2.11 9.52±0.85 5.08±0.48 2.39±0.28
    治疗3个月 6.92±0.49# 8.65±0.97# 7.39±0.41# 4.72±0.35# 1.94±0.25#
    度拉糖肽组 治疗前 9.91±0.69 13.98±2.26 9.44±0.79 5.02±0.51 2.41±0.30
    治疗3个月 6.64±0.51*# 8.19±1.01*# 6.81±0.36*# 4.48±0.29*# 1.62±0.27*#
    *P<0.05,与利拉鲁肽组比较;#P<0.05,与本组治疗前比较。
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    治疗前,度拉糖肽组体脂肪率、体重指数、四肢皮下脂肪率、内脏脂肪指数与利拉鲁肽组相比,均无统计学差异(P>0.05)。治疗3个月,2组体脂肪率、体重指数、四肢皮下脂肪率、内脏脂肪指数低于治疗前,且度拉糖肽组较利拉鲁肽组低(P<0.05),结果见表3

    表  3  2组患者体脂成分测定(n=100,$ \bar x $±s
    组别 时间 体脂肪率(%) 体重指数(kg/m2 四肢皮下脂肪率(%) 内脏脂肪指数(%)
    利拉鲁肽组 治疗前 34.71±1.53 30.08±0.95 38.72±7.38 13.47±2.08
    治疗3个月 32.08±1.16# 27.35±1.24# 35.81±4.05# 12.15±0.98#
    度拉糖肽组 治疗前 34.95±1.61 30.22±0.73 39.03±8.29 13.68±1.96
    治疗3个月 31.20±1.27*# 26.61±1.08*# 34.29±3.17*# 11.34±1.05*#
    *P<0.05,与利拉鲁肽组比较;#P<0.05,与本组治疗前比较。
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    2组治疗前血清adiponectin、NPQ、asprosin、irisin水平相比,均无统计学差异(P>0.05)。治疗3个月,2组血清adiponectin、NPQ、irisin水平均较治疗前升高,血清asprosin水平低于治疗前,且度拉糖肽组血清adiponectin、NPQ、irisin水平较利拉鲁肽组高,血清asprosin水平较利拉鲁肽组低(P<0.05),结果见表4

    表  4  2组患者血清脂肪因子水平测定(n=100,$ \bar x $±s
    组别 时间 adiponectin(ρB/mg·L−1 NPQ(ρB/ng•L−1 asprosin(ρB/μg·L−1 irisin(ρB/ng·L−1
    利拉鲁肽组 治疗前 3.62±0.79 915.73±208.43 2.25±0.51 2.85±0.76
    治疗3个月 4.28±1.02# 1577.93±234.61# 1.16±0.38# 4.12±0.84#
    度拉糖肽组 治疗前 3.74±0.81 932.39±211.34 2.19±0.47 2.91±0.79
    治疗3个月 6.21±1.17#* 1786.54±251.49#* 0.95±0.33#* 4.73±0.62#*
    #P<0.05,与本组治疗前比较;*P<0.05,与利拉鲁肽组比较。
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    治疗3个月,度拉糖肽组有效率(98.00%),利拉鲁肽组有效率(91.00%),度拉糖肽组高于利拉鲁肽组(P<0.05),结果见表5

    表  5  2组患者临床疗效比较[例(%)](n=100)
    组别显效有效无效有效率
    利拉鲁肽组54(54.00)37(37.00)9(9.00)91(91.00)
    度拉糖肽组63(63.00)35(35.00)2(2.00)98(98.00)
    χ24.714
    P0.030
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    治疗期间度拉糖肽组不良反应发生率(11.00%)与利拉鲁肽组(14.00%)相比,无统计学差异(P>0.05),结果见表6

    表  6  2组患者不良反应比较[例(%)]
    组别恶心呕吐低血糖腹部不适发生率
    利拉鲁肽组(n=100)7(7.00)3(3.00)4(4.00)14(14.00)
    度拉糖肽组(n=100)6(6.00)2(2.00)3(3.00)11(11.00)
    χ20.411
    P0.521
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    二甲双胍是国内外指南均推荐的T2DM一线治疗药物,其通过活化胰岛素,改善外周胰岛素抵抗,减少肝脏葡萄糖输出量,从而发挥降低血糖的作用,且可减轻患者体重[8-9]。肥胖作为T2DM的独立危险因素,其诱发高血糖机制更加复杂,会增加治疗难度。GLP-1是刺激胰岛素释放肠促胰素,可抑制β细胞凋亡,促使胰岛素合成及分泌,且经皮下注射,可显著降低血糖。另有研究表明,GLP-1通过可抑制胰腺α细胞合成胰高血糖素,有效减轻患者体重[10]。因此,以二甲双胍为基础的联合GLP-1方案是肥胖T2DM患者重要治疗方案。

    度拉糖肽和利拉鲁肽均为GLP-1类似药物,能作用于胰岛β细胞促使胰岛素释放,同时还能通过调控胃肠蠕动和胃部排空,控制血糖。李秋胜等[11]研究结果显示,度拉糖肽联合二甲双胍治疗T2DM有效率高于利拉鲁肽联合二甲双胍。本研究结果也显示,度拉糖肽组有效率98.00%高于利拉鲁肽组91.00%(P<0.05),与上述研究结果一致,进一步证实了度拉糖肽联合二甲双胍治疗肥胖型T2DM疗效确切。另外,治疗3个月后,2组FBG、2 h PBG、HbAlc、TC、TG、体脂肪率、体重指数、四肢皮下脂肪率、内脏脂肪指数均较治疗前降低(P<0.05),说明两种治疗方案均能改善机体糖脂代谢状态,调节体脂成分,对病情恢复具有积极意义。而度拉糖肽组上述指标降低幅度大于利拉鲁肽组(P<0.05),究其原因可能是:①度拉糖肽是新型长效性GLP-1药物,每周注射1次,且不受饮食等因素影响,使用更简便,可提高患者治疗依从性;②度拉糖肽是基因融合蛋白,与人体GLP-1同源程度超过90%,可更好发挥天然GLP-1作用,且相对分子质量较大,经过肾脏代谢速度较慢,可延长药效时间[12]。此外,二甲双胍具有降血糖与减重作用,但代谢速度也较快,度拉糖肽与其相结合,协同增效作用更为明显。度拉糖肽组治疗期间不良反应率与利拉鲁肽组比较,差异无统计学意义(P>0.05),表明度拉糖肽联合二甲双胍是肥胖T2DM安全可行的治疗方案。

    近年肥胖型T2DM患者逐渐增多,代谢调控细胞越来越受到临床关注,有可能成为临床治疗新靶点。有研究证实[13],脂肪组织属于机体内分泌器官,可合成和分泌脂肪因子,参与T2DM病理代谢进程。adiponectin、NPQ、irisin均为保护性脂肪因子,能改善胰岛素敏感性,维持机体能量代谢稳定。相关文献表明[14-16],T2DM患者血清adiponectin、NPQ、irisin水平低于正常人群,血糖控制后,血清上述指标水平升高,且升高幅度与血糖控制效果呈正相关。因此,血清adiponectin、NPQ、irisin水平可作为反映疾病预后效果的敏感性指标。asprosin作为肝脏脂肪因子,在胰岛素抵抗状态下呈高水平表达,会激活G蛋白相关信号通路促使肝葡萄糖释放,加快糖尿病的病理进程。且有研究[17-18]显示,葡萄糖依赖性刺激会抑制asprosin释放,且与胰岛素抵抗、肥胖、机体代谢密切相关。本研究显示,2组患者治疗3个月后血清adiponectin、NPQ、asprosin、irisin水平较治疗前均有改善,且度拉糖肽组血清adiponectin、NPQ、irisin水平高于利拉鲁肽组,asprosin水平低于利拉鲁肽组(P<0.05),提示度拉糖肽联合二甲双胍能更好地增强脂肪因子的调节效果。分析可能原因为,二甲双胍可降低食欲,减少能量摄入与体内脂肪含量;度拉糖肽也可抑制食欲,增加饱腹感,减少食物摄入量,二者联合能共同促进脂肪组织消耗、分解,抑制脂肪细胞合成,从而能更好地调节脂肪因子水平,但具体机制仍需进一步探索。肥胖型T2DM作为一种慢性疾病,其远期疗效一直是临床关注的焦点。武艳丽等[19]研究显示,随访6个月和1年,度拉糖肽的降糖疗效优于利拉鲁肽。但由于研究时间限制,本研究治疗结束后未进行随访,对机体体脂成分及血清脂肪因子的远期影响尚不明确,有待增加随访时间做进一步探究。

    综上可知,度拉糖肽与二甲双胍治疗肥胖型T2DM可提高临床疗效,促进糖脂代谢,并能调节体脂成分及血清脂肪因子,减轻患者肥胖症状,且具有较高安全性。但本研究为单中心研究,受选取样本量、治疗时间等因素影响,研究结果可能存在偏倚,有待扩大样本,延长治疗时间做进一步分析。

  • 图  1  对萼猕猴桃根粉末显微特征

    A、B、C.草酸钙针晶;D、E.石细胞团;F.木栓细胞;G、H.木纤维管胞;I、J.韧皮纤维;K、L.孔纹导管;M.具缘纹孔导管;N.梯形导管;O、P.孔纹导管(不均匀增厚);B、Q.内皮层细胞;R.木射线细胞;S.草酸钙簇晶;T.支链淀粉粒。

    图  2  大籽猕猴桃根粉末显微特征

    A、B、:草酸钙针晶;C、D:石细胞团;E、F:韧皮纤维;G:木栓细胞;H:孔纹导管;I:网纹导管;J、K:晶鞘纤维。

    图  3  软枣猕猴桃根粉末显微特征

    A、B、C:石细胞;D:具缘纹孔导管;E:网纹导管;F:孔纹导管;G:木纤维管胞;H:木纤维;I:韧皮纤维;J:草酸钙簇晶;K、L、M:草酸钙针晶;N:散在淀粉粒。

    图  4  中华猕猴桃根粉末显微特征

    A:草酸钙针晶;B:石细胞管;C:网纹导管;D:具缘纹孔导管;E:螺纹导管;F:木纤维;G:木栓细胞;H:草酸钙簇晶;I:散在淀粉粒。

    表  1  实验材料信息

    采集号植 物产地日期
    1对萼猕猴桃浙江衢州2005-12-10
    2对萼猕猴桃浙江衢州2006-05-10
    3对萼猕猴桃浙江开化2005-12-10
    4对萼猕猴桃浙江衢州2006-05-10
    5对萼猕猴桃浙江磐安2006-09-29
    6对萼猕猴桃浙江磐安2009-11-23
    7对萼猕猴桃浙江衢州2006-10-01
    8软枣猕猴桃吉林长白2010-09-20
    9软枣猕猴桃吉林长白2011-08-20
    10中华猕猴桃浙江衢州2006-05-10
    11中华猕猴桃浙江磐安2021-03-09
    12中华猕猴桃上海板扎猕猴桃园2021-03-27
    13大籽猕猴桃浙江富阳2005-10-06
    14大籽猕猴桃浙江富阳2005-10-20
    15对萼猕猴桃(饮片)上海虹桥饮片厂2005-06-30
    16猫人参饮片(对萼猕猴桃)上海虹桥饮片厂2021-02-22
    17猫人参饮片(对萼猕猴桃)浙江衢州2007-09-28
    18藤梨根(饮片)上海虹桥饮片厂2021-02-22
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    表  2  粉末鉴定特征

    种名草酸钙针晶石细胞木栓细胞纤维导管草酸钙簇晶淀粉粒
    对萼猕猴桃根众多,散在或成束,两种类型:一种长而粗,长127~312μm,直径8~13 μm;一种短而细,直径23~
    87 μm,成球状针晶丛。少数批次还含有细小似砂晶状
    针晶
    众多,单个或成石细胞团存在,多无色、黄棕色、淡黄色、青绿色;呈多边形,长方形,多角形。纹孔明显,壁厚6~
    8 μm
    较多,表面观呈类方形,细胞含黄色、红橘色内含物,具纹孔,壁较厚,非木化或微木化木纤维、管胞,平直或稍弯曲,长条形或梭形,末端稍尖,直径18~23μm,壁厚7~9 μm,具缘纹孔略作纵向排列。韧皮纤维二三成束,淡黄色,呈长条形,末端钝圆,直径31~
    57 μm,长556~
    644 μm,壁厚,纹孔不明显,孔沟明显
    网纹,孔纹,梯纹,多碎片,直径22~
    67 μm。有的具缘纹孔横向延长成梯状或网状具缘纹孔
    导管
    草酸钙簇晶,直径24~
    36 μm,棱角宽钝
    较多支链淀粉,呈树枝性分支,单粒类圆形,直径3~8 μm
    大籽猕猴桃根众多,散在或成束,两种类型:一种长而粗,长213~374 μm,直径5~11 μm;一种短而细,直径约85~121 μm,成球状针
    晶丛
    众多,单个存在或成多边形石细胞团,无色,淡黄色,青绿色。多数呈圆形,长方形,多角形。纹孔明显,壁厚6~13 μm少见,多层重叠,表面观类方形,少数细胞内有黄色内含物,壁较厚,微木化木纤维少见。韧皮纤维多见且二三成束,黄绿色,呈长条形,末端钝圆,直径48~89 μm,长213~398 μm,壁厚14 μm,纹孔、孔沟均明显可见孔纹,网纹,直径89~247 μm//
    软枣猕猴桃根较少,多成束存在
    粘液细胞中,针晶
    较长而粗,长103~
    247 μm,直径6~
    9 μm。另一种直
    径短而细,成类球
    状针晶丛
    多数单个散在,无色,类圆形,孔纹明显,壁厚。直径
    119 μm,壁厚
    24 μm,少数成细胞团,淡黄色,壁厚
    /主为纤维管胞,较少,无色,长条形,末端稍尖,有稀疏孔纹,直径27~51 μm,壁厚2~5 μm,非木化。韧皮纤维较少,淡黄色,成束存在,末端圆钝,直径
    44 μm
    网纹,孔纹,具缘纹孔不均匀增厚,多碎片状较多,直径23~37 μm,棱角宽钝淀粉粒,较多,单粒类圆形,直径1.6~2.5 μm
    中华猕猴桃根众多,散在或成束存在粘液细胞中,针晶较长而粗,长157~281 μm,直径6~
    21 μm
    单个散在,或成细胞团,淡黄色,无色,类圆形,孔纹明显,壁厚18 μm表面观呈类方形,栓内细胞含黄色、橘红色内含物,纹孔较少,壁增厚,非木化或微木化木纤维,二三成束,较少,长条形,无色,有稀疏孔纹,直径约23 μm多网纹,孔纹,梯纹,螺纹,多成碎片状较多,直径24~37 μm,棱角宽钝有淀粉粒,较多,单粒类圆形,直径2~
    7 μm
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    表  3  4种猕猴桃属植物的鉴定表

    植物草酸钙结晶淀粉粒螺纹导管
    软枣猕猴桃簇晶丛单粒,类圆形
    对萼猕猴桃簇晶状单粒,支链形
    中华猕猴桃束状,类球状针晶丛单粒,类圆形
    大籽猕猴桃
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出版历程
  • 收稿日期:  2021-11-01
  • 修回日期:  2022-12-12
  • 刊出日期:  2023-07-25

4种猕猴桃药用植物根的显微鉴定研究

doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202111002
    基金项目:  上海市科委生物医药领域科技支撑项目课题(16401901700);浙江省重点高校建设优势学特色学科重点项目(ZYAOX2018018)
    作者简介:

    吴 雅,硕士研究生,Email:1162633313@qq.com

    通讯作者: 蒋益萍,硕士,高级实验师,研究方向:中药鉴定及品质评价,Email:msjyp@163.com辛海量,教授,研究方向:中药资源、品质评价和药理学研究,Email:hailiangxin@163.com

摘要:   目的  对大籽猕猴桃、对萼猕猴桃、软枣猕猴桃、中华猕猴桃4种猕猴桃属基植物的根进行显微鉴定研究,为准确鉴定生药提供依据。  方法  采用显微鉴定法对4种猕猴桃药用植物根的粉末进行显微鉴定研究。  结果  以草酸钙簇晶、淀粉粒、导管之形态特征为主要差异点,编制检索表,可用于鉴定此4种药用植物根之间的鉴别。  结论  4种猕猴桃属植物根粉末显微特征可用于鉴定此4种生药,值得进一步研究。

English Abstract

孟祥庆, 李丽华, 王宏瑞, 贾丹, 贾敏. 基于网络药理学和反向分子对接的西红花抗肿瘤作用机制研究[J]. 药学实践与服务, 2023, 41(3): 160-167, 196. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202206066
引用本文: 吴雅, 蒋益萍, 张成中, 王娜妮, 辛海量. 4种猕猴桃药用植物根的显微鉴定研究[J]. 药学实践与服务, 2023, 41(7): 433-436. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202111002
MENG Xiangqing, LI Lihua, WANG Hongrui, JIA Dan, JIA Min. Anti-tumor mechanism study on saffron by network pharmacology and reverse molecular docking[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2023, 41(3): 160-167, 196. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202206066
Citation: WU Ya, JIANG Yiping, ZHANG Chengzhong, WANG Nani, XIN Hailiang. Microscopic identification for roots from 4 medicinal plants of Actinidia genus[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2023, 41(7): 433-436. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202111002
  • 猕猴桃属植物全球共约有54种,中国有52种以上,是该属的分布中心。目前作为药用的种类主要有:对萼猕猴桃(Actinidia valvata Dunn)根作猫人参入药[1-3],大籽猕猴桃(Actinidia macrosperma C.F. Liang)根也有作猫人参入药者[4],中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.)根作猕猴桃根入药,也有作藤梨根入药者[5-6],软枣猕猴桃[Actinidia arguta (Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq.]根作藤梨根入药[7]。此4种药用植物的根入药,临床用药较多,多具有清热利湿,解毒散结的功效,但由于在性状方面也非常相似,易发生混淆,颇有对其鉴定研究之必要。

    • 生物显微成像仪(德国徕卡);Leica Application Suite 4.9.0图像分析处理软件显微成像系统(德国徕卡);Photoshop CS4软件(美国Adobe公司)。

    • 共收集18个批次的猕猴桃材料供鉴定用,见表1;载玻片,盖玻片,解剖针,水合氯醛,酒精灯。

      表 1  实验材料信息

      采集号植 物产地日期
      1对萼猕猴桃浙江衢州2005-12-10
      2对萼猕猴桃浙江衢州2006-05-10
      3对萼猕猴桃浙江开化2005-12-10
      4对萼猕猴桃浙江衢州2006-05-10
      5对萼猕猴桃浙江磐安2006-09-29
      6对萼猕猴桃浙江磐安2009-11-23
      7对萼猕猴桃浙江衢州2006-10-01
      8软枣猕猴桃吉林长白2010-09-20
      9软枣猕猴桃吉林长白2011-08-20
      10中华猕猴桃浙江衢州2006-05-10
      11中华猕猴桃浙江磐安2021-03-09
      12中华猕猴桃上海板扎猕猴桃园2021-03-27
      13大籽猕猴桃浙江富阳2005-10-06
      14大籽猕猴桃浙江富阳2005-10-20
      15对萼猕猴桃(饮片)上海虹桥饮片厂2005-06-30
      16猫人参饮片(对萼猕猴桃)上海虹桥饮片厂2021-02-22
      17猫人参饮片(对萼猕猴桃)浙江衢州2007-09-28
      18藤梨根(饮片)上海虹桥饮片厂2021-02-22
    • 分别取适量样品(1~18号),粉碎,过80目筛网,取适量粉末置载玻片上,滴加水合氯醛1~2滴,加热透化至微干,再滴加稀甘油1滴,用解剖针混匀,盖上盖玻片,光学生物显微镜下观察其显微特征、特殊细胞的形态和结构(表2),利用Leica Application Suite 4.9.0图像分析处理软件显微成像系统捕获典型图像,添加标尺,经过相应的图像处理软件处理后保存图片数据。

      表 2  粉末鉴定特征

      种名草酸钙针晶石细胞木栓细胞纤维导管草酸钙簇晶淀粉粒
      对萼猕猴桃根众多,散在或成束,两种类型:一种长而粗,长127~312μm,直径8~13 μm;一种短而细,直径23~
      87 μm,成球状针晶丛。少数批次还含有细小似砂晶状
      针晶
      众多,单个或成石细胞团存在,多无色、黄棕色、淡黄色、青绿色;呈多边形,长方形,多角形。纹孔明显,壁厚6~
      8 μm
      较多,表面观呈类方形,细胞含黄色、红橘色内含物,具纹孔,壁较厚,非木化或微木化木纤维、管胞,平直或稍弯曲,长条形或梭形,末端稍尖,直径18~23μm,壁厚7~9 μm,具缘纹孔略作纵向排列。韧皮纤维二三成束,淡黄色,呈长条形,末端钝圆,直径31~
      57 μm,长556~
      644 μm,壁厚,纹孔不明显,孔沟明显
      网纹,孔纹,梯纹,多碎片,直径22~
      67 μm。有的具缘纹孔横向延长成梯状或网状具缘纹孔
      导管
      草酸钙簇晶,直径24~
      36 μm,棱角宽钝
      较多支链淀粉,呈树枝性分支,单粒类圆形,直径3~8 μm
      大籽猕猴桃根众多,散在或成束,两种类型:一种长而粗,长213~374 μm,直径5~11 μm;一种短而细,直径约85~121 μm,成球状针
      晶丛
      众多,单个存在或成多边形石细胞团,无色,淡黄色,青绿色。多数呈圆形,长方形,多角形。纹孔明显,壁厚6~13 μm少见,多层重叠,表面观类方形,少数细胞内有黄色内含物,壁较厚,微木化木纤维少见。韧皮纤维多见且二三成束,黄绿色,呈长条形,末端钝圆,直径48~89 μm,长213~398 μm,壁厚14 μm,纹孔、孔沟均明显可见孔纹,网纹,直径89~247 μm//
      软枣猕猴桃根较少,多成束存在
      粘液细胞中,针晶
      较长而粗,长103~
      247 μm,直径6~
      9 μm。另一种直
      径短而细,成类球
      状针晶丛
      多数单个散在,无色,类圆形,孔纹明显,壁厚。直径
      119 μm,壁厚
      24 μm,少数成细胞团,淡黄色,壁厚
      /主为纤维管胞,较少,无色,长条形,末端稍尖,有稀疏孔纹,直径27~51 μm,壁厚2~5 μm,非木化。韧皮纤维较少,淡黄色,成束存在,末端圆钝,直径
      44 μm
      网纹,孔纹,具缘纹孔不均匀增厚,多碎片状较多,直径23~37 μm,棱角宽钝淀粉粒,较多,单粒类圆形,直径1.6~2.5 μm
      中华猕猴桃根众多,散在或成束存在粘液细胞中,针晶较长而粗,长157~281 μm,直径6~
      21 μm
      单个散在,或成细胞团,淡黄色,无色,类圆形,孔纹明显,壁厚18 μm表面观呈类方形,栓内细胞含黄色、橘红色内含物,纹孔较少,壁增厚,非木化或微木化木纤维,二三成束,较少,长条形,无色,有稀疏孔纹,直径约23 μm多网纹,孔纹,梯纹,螺纹,多成碎片状较多,直径24~37 μm,棱角宽钝有淀粉粒,较多,单粒类圆形,直径2~
      7 μm
    • 总结猕猴桃植物根的显微特征(表2),拍摄显微特征照片(图14)。以草酸钙结晶、淀粉粒、导管之形态特征为差异点,编制4种猕猴桃属植物的鉴定表,见表3

      图  1  对萼猕猴桃根粉末显微特征

      图  2  大籽猕猴桃根粉末显微特征

      图  3  软枣猕猴桃根粉末显微特征

    • 4种猕猴桃属植物根作为抗癌药物在临床上被广泛使用,但因其显微鉴定研究内容较少,因此常发生混淆入药的情况。翟延君[3]曾对软枣猕猴桃根横切面和粉末的显微特征进行了详细研究,结果发现草酸钙针晶、石细胞、木纤维、木栓细胞、韧皮细胞等显微组织结构可以作为软枣猕猴桃粉末的主要鉴别特征。之后王忠壮[4]横向比较了藤梨根与猫人参饮片横切面的特征差异,为开发资源和合理用药提供基础研究。但仍未见对4种猕猴桃植物根的显微鉴别特征作详细报道。因此,本研究不仅对4种猕猴桃植物根的横切面和粉末显微特征进行详细观察总结,同时横向比较了4种植物根的粉末显微鉴定结果,总结以草酸钙结晶的种类和数量、淀粉粒的形态和排列方式、螺纹导管为其鉴定的主要差异点,编制检索表,可用于鉴定此4种药用植物根。后续拟收集更多材料,进行深入研究,发展更为全面,行之有效的显微鉴定方法。

      图  4  中华猕猴桃根粉末显微特征

      表 3  4种猕猴桃属植物的鉴定表

      植物草酸钙结晶淀粉粒螺纹导管
      软枣猕猴桃簇晶丛单粒,类圆形
      对萼猕猴桃簇晶状单粒,支链形
      中华猕猴桃束状,类球状针晶丛单粒,类圆形
      大籽猕猴桃
参考文献 (7)

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