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河豚毒素是一种钠通道阻滞剂，可以导致人类中毒和死亡[1]。河豚毒素不仅存在于河豚科的河豚中，而且在海洋和陆地环境的多种生物中均有发现[2-4]。河豚毒素作用时具有选择性，其与心肌NaV通道缺乏亲和力，且无法穿透血脑屏障，这些特性使其成为麻醉和镇痛药物设计的有吸引力的候选者[5]。河豚毒素的毒理作用在神经性、急性和炎症性疼痛模型中得到证实[6-8]。在远低于半数致死剂量（LD50）的浓度下，河豚毒素对神经系统的急性和瞬时作用使其在最低浓度时即可达到预期结果[9]。然而，河豚毒素的高毒性引发人们对其安全性问题的关注，本文利用斑马鱼模型研究河豚毒素的急性毒性，旨在为评价河豚毒素的安全性提供依据。
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河豚毒素[中洋生物科技（上海）股份有限公司，批号：2020102307]，用醋酸盐缓冲液配制成10.0 mmol/L母液，冷藏避光储存。斑马鱼饲养于28 ℃的养鱼用水中（水质：每1 L反渗透水中加入200 mg速溶海盐，电导率为450~550 μS/cm，pH为6.5~8.5，硬度为50~100 mg/L CaCO3），由杭州环特生物科技股份有限公司养鱼中心繁殖提供，实验动物使用许可证号为：SYXK（浙）2012-0171，饲养管理符合国际AAALAC认证（编号：001458）的要求。野生型AB品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行，年龄为受精后2 d（2 dpf）。
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随机选取2 dpf野生型AB品系斑马鱼于6孔板中，每孔（实验组）均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予河豚毒素（浓度为0.125、0.250、0.500、1.00、2.00、4.00、8.00、16.0、32.0、64.0 µmol/L），同时设置正常对照组和溶剂对照组，每孔容量为3 ml。28 ℃处理72 h，每天统计各实验组的斑马鱼死亡数量并及时移除。
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实验结束后，在解剖显微镜下观察并记录斑马鱼心脏、循环系统、出血及血栓、脑、下颌、眼睛、肝脏、肾脏、肠道、躯干/尾/脊索、肌肉/体节、身体着色、体长等变化情况，采集典型毒性器官照片。以各器官的毒性发生率评价河豚毒素样品对斑马鱼的急性毒性，并鉴别毒性靶器官。
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用Origin 8.0统计学软件绘制“浓度-死亡率”效应曲线，并计算河豚毒素对斑马鱼的MNLC和LC10。
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研究结果显示，正常对照组和溶剂对照组斑马鱼的死亡率均为0；0.125～8.00 µmol/L的河豚毒素处理后斑马鱼的死亡率均为0；当河豚毒素的浓度达到16.0 µmol/L时，斑马鱼死亡4尾，死亡率为13%，当河豚毒素的浓度达到32.0 µmol/L时，斑马鱼死亡29尾，死亡率为97%，而当河豚毒素的浓度达到64.0µmol/L时，斑马鱼死亡30尾，死亡率为100%。经Origin 8.0软件模拟得出河豚毒素对斑马鱼急性毒性MNLC为8.62 μmol/L，LC10为15.2 µmol/L，详见图1。
图 1 河豚毒素“浓度－死亡率”曲线
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在本实验条件下浓度摸索过程中，16.0 μmol/L及以上浓度诱发心包水肿和心律异常，河豚毒素处理后72 h出现部分或全部死亡。如表1和图2、图3所示，河豚毒素急性毒性靶器官是心脏和肝脏，当河豚毒素的浓度达到0.958 µmol/L及以上时，斑马鱼表现出卵黄囊吸收延迟。当河豚毒素的浓度达到2.87 µmol/L及以上时斑马鱼表现出心律异常和肠腔异常。当河豚毒素浓度达到8.62 µmol/L及以上时斑马鱼表现出心包水肿。不同浓度的河豚毒素均未发现躯干/尾/脊索、肌肉/体节、身体着色以及体长生长等异常。
表 1 河豚毒素急性毒性发生率统计（n=30）
毒性类型 正常对照组 溶剂对照组 河豚毒素浓度（μmol/L） 0.958 2.87 8.62 15.2 心脏 心包水肿 - - - - 7(2/30) 13(4/30) 房室缺失 - - - - - - 心律异常 - - - 7(2/30) 7(2/30) 17(5/30) 循环系统 血流变慢 - - - - - - 循环缺失 - - - - - - 出血及血栓 - - - - - - 脑 畸形 - - - - - - 下颌 短小 - - - - - - 眼睛 眼变小 - - - - - - 肝脏 缺失 - - - - - - 肝肿大 - - - - - - 肝变性 - - - - - - 卵黄囊吸收延迟 - - 80(24/30) 80(24/30) 87(26/30) 93(28/30) 肾脏 水肿 - - - - - - 肠道 肠腔异常 - - - 7(2/30) 13(4/30) 13(4/30) 躯干/尾/脊索 弯曲 - - - - - - 肌肉/体节 肌肉变性 - - - - - - 身体着色 异常 - - - - - - 体长变短 - - - - - 死亡 - - - - - 注：“-”表示未见明显异常 
图 2 河豚毒素处理后的斑马鱼毒性表型
图 3 河豚毒素处理后的斑马鱼体长表型
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河豚毒素是一种致命的神经毒素，作为一种选择性Na+通道阻滞剂，其在生物医学中的应用引起了广泛关注[10]。日本传统医学中曾使用河豚鱼来治疗麻风病患者的神经痛，后来河豚毒素被发现、提取和纯化，并用于抑制破伤风患者的痉挛[11]。近年来，在双壳贝类中也发现了河豚毒素。例如，2011年在新西兰发现一种蛤类中的河豚毒素（0.8 mg/kg）[12]，2014年英国学者发现贻贝和太平洋牡蛎样本中的河豚毒素（0.003～0.12 mg/kg）[13]。这些证据表明，河豚毒素对于食品安全来说具有一定的威胁，因此，国际食品和药品监管机构将河豚毒素作为一种新的风险。
在本研究中我们通过使用MNLC和LC10这两个指标，以评估河豚毒素对斑马鱼的急性毒性。研究发现，当河豚毒素的浓度达到16.0 μmol/L时，斑马鱼出现了心包水肿和心律异常，导致部分或者全部的斑马鱼死亡。有研究证实，选择性激活河豚毒素敏感的神经元钠通道可以安全地增加心脏收缩力[14]。还有研究结果显示，河豚毒素的肌肉内给药改变了肝脏中参与各种信号通路的肝脏基因的表达[15]。由此可见，河豚毒素对斑马鱼具有明显的心脏和肝脏毒性，且其毒性随着河豚毒素浓度的升高而增强。
目前，尚无针对河豚毒素的解毒剂，一旦摄入河豚毒素，严重中毒者可发生心力衰竭甚至死亡[16]。多年前有研究者收治了5例河豚毒素中毒者，患者出现了肾脏损害，表现为多尿，经过治疗后仍有患者死亡[17]。在日本，监管规定了河豚毒素的摄入浓度不得超过2 mg/kg[11]。目前，关于河豚毒素急性毒性的可用数据非常少，而且现有的大部分数据都缺乏足够的实验细节。有研究者发现，在昆明小鼠腹膜内（ip）、皮下（sc）和胃内（ig）注射的中位致死剂量（LD50）分别为10.7、12.5、532 μg/kg[18]。我们在斑马鱼模型中研究发现，河豚毒素对斑马鱼急性毒性MNLC为8.62 μmol/L，LC10为15.2 µmol/L，急性毒性靶器官是心脏和肝脏，主要表现为心包水肿、心律异常和卵黄囊吸收延迟，毒性出现浓度为0.958 µmol/L。
本研究还存在一定的不足。作为一种常用于药物毒性评价的模式生物，斑马鱼具有易养殖、繁殖快、成本低等优势，但斑马鱼被用于药物毒性检测时易存在假阳性和假阴性。因此，本研究的结论还需要在其他动物模型中进一步研究。
The acute toxicity of tetrodotoxin to zebra fish
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摘要:
目的 研究河豚毒素对斑马鱼的急性毒性。 方法 在斑马鱼中用最大非致死浓度（MNLC）和10%致死浓度（LC10）测定和评估河豚毒素的急性毒性。 结果 经Origin 8.0软件模拟，得出河豚毒素对斑马鱼急性毒性MNLC为8.62 μmol/L，LC10为15.2 μmol/L。在本实验条件下，16.0 μmol/L及以上浓度河豚毒素可诱发斑马鱼心包水肿和心律异常，终点时出现部分或全部死亡。河豚毒素的急性毒性靶器官是心脏和肝脏，主要表现为心包水肿、心律异常和卵黄囊吸收延迟，毒性出现浓度为0.958 μmol/L。 结论 河豚毒素对斑马鱼具有一定的心脏和肝脏毒性，且其毒性与河豚毒素的浓度相关。 Abstract:Objective To study the acute toxicity of tetrodotoxin to zebra fish. Methods The maximum non-lethal concentration (MNLC) and 10% lethal concentration (LC10) determinations were used to assess the acute toxicity of tetrodotoxin. Results According to the simulation calculation of Origin 8.0 software, the MNLC was 8.62 µmol/L and 15.2 µmol/L for LC10. Under the experimental conditions, tetrodotoxin at a concentration of 16.0 µmol/L and above induced pericardial edema and arrhythmia, leading to the death of zebra fish. The target organs for acute toxicity of tetrodotoxin were the heart and liver. The main manifestations were pericardial edema, arrhythmia, and delayed yolk sac absorption. The toxicity appeared at a concentration of 0.958 µmol/L. Conclusion Tetrodotoxin has heart and liver toxicity to zebra fish, and its toxicity is dose-dependent. -
Key words:
- tetrodotoxin /
- zebra fish /
- acute toxicity
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补骨脂（Psoralea corylifolia Linn）为豆科植物，以干燥成熟果实入药，性温，味辛、苦，归肾、脾经。有温肾助阳，纳气平喘，温脾止泻等功效，主治骨质疏松症、骨软化症、关节痛、哮喘、白癜风、银屑病、遗尿尿频、肾虚作喘等疾病，在中医临床治疗中被广泛应用于脾肾阳虚的治疗，但长期或者超量使用补骨脂及其制剂可导致肝损伤，临床表现主要为皮肤巩膜黄染、尿黄、乏力和食欲不振，同时伴有丙氨酸转移酶（ALT）、总胆红素（T-Bil）和直接胆红素（D-Bil）等生化指标不同程度升高，肝脏肿大或肝脏弥漫性病变。实验研究也表明，长期或大剂量服用补骨脂可引起大鼠不同程度的肝损伤。然而，补骨脂肝损伤成分和潜在机制至今尚未得到阐明。在本研究中，我们通过生物信息学工具评价补骨脂诱导肝损伤的潜在作用机制，为补骨脂肝损伤的临床和基础研究提供参考依据。
1. 材料与方法
1.1 软件与数据库
TCMIP (http://lsp.nwu.edu.cn/, Version 2.3)；Pharm Mapper (http://59.78.96.61/pharmmapper/)；Uniprot数据库中UniprotKB检索功能（http://www.uniprot.org/）；String数据库（https://string-db.org/, Version 4.5.0）；Disgenet（https://www.disgenet.org/）；DAVIA基因富集分析网站 (http://david.ncifcrf.gov/summary.jsp)；Cytoscape软件(Version 2.7.1)；Chembiodraw Ultra软件 (Version14.0)
1.2 补骨脂肝损伤成分筛选与靶点预测
通过TCMIP数据库获取补骨脂所有化学成分，再结合文献挖掘与整理，筛选出补骨脂的主要成分，并对成分进行预测。
登陆Pharm Mapper服务器，上传上述补骨脂成分，获得虚拟筛选结果。利用UniProt数据库中UniProtKB搜索功能，输入蛋白名称，限定物种为人，预测补骨脂成分的作用靶点。
在Disgenet数据库中搜索药物性肝损伤相关的基因，去除重复基因和假阳性基因，与上述Pharm Mapper 服务器中返回的靶点相匹配，得到补骨脂成分诱导肝损伤的潜在作用靶点。
1.3 网络构建与分析
将补骨脂诱导肝损伤的作用靶点导入String数据库，利用Multiple proteins工具，选择“Homo Sapiens”为生物体，获取蛋白相互作用。将补骨脂成分和作用靶点信息以源节点和节点直接导入Cytoscape3.7.1，构建药材-成分-靶标-疾病网络。借助Network Analyzer工具对网络进行拓扑参数分析，并筛选出补骨脂诱导肝损伤的关键靶蛋白。
1.4 基因本体功能（GO）注释和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析
用DAVID 6.7 (http://david.ncifcrf.gov/summary.jsp) 对补骨脂药物性肝损伤PPI网络中的节点蛋白进行GO注释和KEGG通路分析，并采用R软件对结果进行图形化表示。
2. 结果
2.1 补骨脂成分的相关信息
从TCMIP数据库中共筛选出的32个相关化合物，其中补骨脂素、补骨脂酚、补骨脂查尔酮、异补骨脂素和甲氧补骨脂素等22个符合Lipinski5规则，而补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚为补骨脂主要成分。因此，上述22个化合物全部纳入进一步研究，化合物名称及详细信息见表1。
表 1 补骨脂成分及相关信息化合物 相对分子
质量AlogP 氢键供
体数氢键受
体数Pub
ChemID双羟异补骨脂定 368.30 2.0 3 7 5316096 补骨脂酚 338.40 2.8 2 5 5320772 补骨脂定 336.30 4.7 2 5 5281806 异新补骨脂查尔酮 298.29 3.0 2 5 5318608 异补骨脂二氢黄酮 324.40 4.1 2 4 193679 补骨脂异黄酮醛 282.25 2.5 2 5 44257227 槐属香豆雌烷 A 334.30 4.0 1 5 14630492 补骨脂呋喃查尔酮 340.40 3.5 3 5 6476086 新补骨脂查尔酮 298.29 3.0 2 5 5320052 补骨脂二氢黄酮甲醚 338.40 4.4 1 4 10337211 补骨脂香豆雌烷B 352.30 3.1 2 6 5321820 补骨脂乙素 324.40 5.1 3 4 5281255 新补骨脂异黄酮 322.40 4.4 2 4 5320053 补骨脂查尔酮 324.40 5.1 3 4 6450879 补骨脂色烯素 322.40 4.5 2 4 5321800 异补骨脂定 336.30 4.1 1 5 12304285 甲氧补骨脂素 216.19 1.9 0 4 4114 补骨脂呋喃香豆精 186.16 2.3 0 3 3083848 异补骨脂素 186.16 2.0 0 3 10658 补骨脂素 186.16 2.3 0 3 6199 补骨脂香豆雌烷A 353.30 3.1 2 6 5321811 补骨脂定-2'，3'-环氧化物 352.30 3.3 2 6 44257529 2.2 补骨脂成分肝损伤的靶点预测
将补骨脂22个成分输入Pharm Mapper中，得到所有潜在蛋白质靶点，经UniProt转化为基因ID，并与Disgenet数据库中8类药物性肝损伤挖掘的疾病基因ID根据匹配度由高到低进行排序，去除重复后，匹配共得到31个补骨脂潜在的肝损伤作用靶点，见表2。
表 2 补骨脂成分潜在肝损伤作用靶点序号 Uniprot ID 基因靶点 蛋白靶点 1 P28161 GSTM2 glutathione S-transferase Mu 2 2 O75469 NR1I2 nuclear receptor subfamily 1
group I member 23 P02768 ALB serum albumin 4 P11712 CYP2C9 cytochrome P450 2C9 5 P09211 GSTP1 glutathione S-transferase P 6 P04179 SOD2 superoxide dismutase [Mn], mitochondrial 7 Q96RI1 NR1H4 bile acid receptor 8 P05089 ARG1 arginase-1 9 P00374 DHFR dihydrofolate reductase 10 P02774 GC vitamin D-binding protein 11 P00390 GSR glutathione reductase, mitochondrial 12 P09601 HMOX1 heme oxygenase 1 13 P05019 IGF1 insulin-like growth factor I 14 P80188 LCN2 neutrophil gelatinase-associated lipocalin 15 P17931 LGALS3 galectin-3 16 P08253 MMP2 72 000 type IV collagenase 17 P00491 PNP purine nucleoside phosphorylase 18 Q08257 CRYZ quinone oxidoreductase 19 Q07869 PPARA peroxisome proliferator-activated receptor alpha 20 Q00796 SORD sorbitol dehydrogenase 21 P49888 SULT1E1 sulfotransferase 1E1 22 O00204 SULT2B1 sulfotransferase 2B1 23 P36897 TGFBR1 TGF-beta receptor type-1 24 P02766 TTR transthyretin 25 Q14994 NR1I3 nuclear receptor subfamily 1
group I member 326 Q13133 NR1H3 oxysterols receptor LXR-alpha 27 P37231 PPARG peroxisome proliferator-activated receptor gamma 28 O60760 HPGDS hematopoietic prostaglandin D synthase 29 P04035 HMGCR 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase 30 P06702 S100A9 protein S100-A9 31 P09488 GSTM1 glutathione S-transferase Mu 1 2.3 补骨脂成分-靶点-信号通路-肝损伤网络构建与分析
采用Cytoscape软件的Merge功能构建补骨脂成分-靶点-信号通路-肝损伤网络模型，如图1所示（绿色椭圆代表靶点，黄色椭圆代表成分，粉红色菱形代表疾病，紫色椭圆表示补骨脂），节点代表活性或靶点，边代表成分、作用靶点和疾病间的相互关联，其中共有60个节点，327个边。节点的大小与度的大小呈正比关系，节点越大表示该节点的度越大。依据拓扑分析，13个成分的度值大于10，分别为补骨脂素、补骨脂定、补骨脂酚、异新补骨脂查尔酮、异补骨脂黄酮、补骨脂异黄酮醛、异补骨脂定、双羟异补骨脂定、新补骨脂查尔酮、补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂乙素、补骨脂查尔酮、新补骨脂异黄酮；具有较高度值的靶点蛋白有血清白蛋白（ALB）、谷胱甘肽S-转移酶P（GSTP1）、运甲状腺素蛋白（TTR）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARG）。
采用DAVID在线富集平台进行生物学功能分析，获得103个GO注释（黄色表示生物学过程、绿色表示细胞组成、蓝色表示分子功能）。GO分析表明，靶蛋白大多富集于RNA聚合酶Ⅱ启动子启动转录、类固醇激素介导的信号通路、信号转录、DNA模板转录正调控、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、氧化还原反应、固有免疫应答、细胞对脂多糖（LPS）的反应、细胞氧化解毒等生物学过程，见图2。此外，KEGG富集分析表明，5条通路（P<0.05）受补骨脂的影响，包括化学物致癌、AMPK信号通路、PPAR信号通路、肝药酶P450（CYP）有害物代谢和谷胱甘肽代谢通路等，结果见图3。
3. 讨论
在临床上，补骨脂被广泛应用于治疗骨质疏松、银屑病等多种疾病，其所导致的药物性肝损伤已引起人们关注，但对于其肝损伤成分及分子机制的研究尚不深入。为了探究补骨脂所致肝损伤的作用机制，本研究从补骨脂的成分出发，借助生物信息学技术构建了补骨脂药材-成分-靶点-信号通路-肝损伤网络，分析补骨脂中成分与靶点的作用关系，为其导致肝损伤作用机制研究提供了参考。
通过数据库检索，我们发现补骨脂主要含有补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚、补骨脂定、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮甲醚等22个成分[1-5] ，其中补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚等为主要成分[5-6]。补骨脂中个别成分已被发现具有导致肝损伤的作用，如研究发现补骨脂素与补骨脂酚可通过降低BSEP蛋白的表达，升高NTCP和CYP7A1蛋白的表达，使得进入肝细胞的胆汁酸增多，进而肝细胞中胆汁酸的含量异常升高，最终导致胆汁淤积性肝损伤[7-9]；此外，补骨脂素通过上调细胞周期蛋白E1和p27蛋白水平并下调细胞周期蛋白D1的水平，使肝细胞周期阻滞进而导致肝再生和代偿能力下降而诱发小鼠轻度肝损伤和L02肝细胞损伤；而异补骨脂素通过抑制MRP2和MRP3导致HepG2的细胞肝损伤[10-11]。补骨脂酚在体外的生物利用度远低于补骨脂素和异补骨脂素，但在体内补骨脂酚的CYP450代谢作用较强[12]，补骨脂酚在体内复杂环境中的吸收和代谢可能是导致其在体内外肝损伤差异的主要原因。
通过GO分析整合预测，得到补骨脂导致肝损伤生物功能包括氧化还原反应、固有免疫应答、细胞对LPS的反应、细胞氧化解毒等。目前已知，氧化还原反应与免疫应答在药物性肝损伤发病机制中起关键作用。有研究发现，可溶性T细胞免疫球蛋白结构域和含黏蛋白结构域分子-3（sTIM-3）通过促进自噬和调节单核/巨噬细胞功能，减轻炎症反应和肝损伤[13]。氧化应激介导的脂质过氧化可导致胶原合成增加，氧化还原稳态失衡会干扰线粒体功能障碍进而导致药物引起的肝损伤。ROS可影响过氧化物酶体增殖物激活的受体调节脂肪酸氧化以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和相关的应激敏感激酶活力而调节肝细胞凋亡[14]。LPS参与了肝损伤中炎症或免疫破坏，可通过激活TLR-2和TLR-4途径促进炎症活动，并且LPS诱导的短暂缺血破坏了呼吸链复合物的活性，增强了ROS，从而进一步增强肠道高通透性，并能显著诱导肝损伤[15-16]。
KEGG富集分析结果表明，补骨脂所致肝损伤可能涉及AMPK、PPAR、CYP等多条信号通路。AMPK是NF-κB的上游蛋白，被认为是维持ADP/AMP/ATP水平的关键细胞代谢传感器，AMPK信号通路的激活可抑制非典型NF-κB途径，从而保护肝脏免受损伤[17-18]。PPAR信号通路在肝损伤和肝纤维化中起着关键作用，在活化的HSCs中，PPAR-γ活性降低，从而导致HSCs从维甲酸储存状态向产生ECM的肌成纤维细胞转化，可促进CCl4诱导的肝损伤和纤维化，然而，抑制PPARG可阻止Fsp27α mRNAs的表达，进而减少乙醇诱导小鼠线粒体活性氧生成所导致的肝损伤[19-20]。肝脏CYP酶在药物代谢和清除中发挥关键作用，例如CYP2E1可增加活性氧的数量，进而导致氧化应激肝损伤[21-22]。基于上述结果和理论基础，有必要开展补骨脂AMPK、PPAR等信号通路的作用研究，从而为其肝损伤机制提供理论依据。
综上所述，本研究通过生物信息学技术构建补骨脂药材-成分-靶点-信号通路-肝损伤网络对补骨脂成分所致肝损伤作用机制进行分析预测，研究结果充分表明了补骨脂多成分-多靶点-多通路的肝损伤作用特点，为进一步开展补骨脂致肝损伤作用机制的研究提供了新思路。
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表 1 河豚毒素急性毒性发生率统计（n=30）
毒性类型 正常对照组 溶剂对照组 河豚毒素浓度（μmol/L） 0.958 2.87 8.62 15.2 心脏 心包水肿 - - - - 7(2/30) 13(4/30) 房室缺失 - - - - - - 心律异常 - - - 7(2/30) 7(2/30) 17(5/30) 循环系统 血流变慢 - - - - - - 循环缺失 - - - - - - 出血及血栓 - - - - - - 脑 畸形 - - - - - - 下颌 短小 - - - - - - 眼睛 眼变小 - - - - - - 肝脏 缺失 - - - - - - 肝肿大 - - - - - - 肝变性 - - - - - - 卵黄囊吸收延迟 - - 80(24/30) 80(24/30) 87(26/30) 93(28/30) 肾脏 水肿 - - - - - - 肠道 肠腔异常 - - - 7(2/30) 13(4/30) 13(4/30) 躯干/尾/脊索 弯曲 - - - - - - 肌肉/体节 肌肉变性 - - - - - - 身体着色 异常 - - - - - - 体长变短 - - - - - 死亡 - - - - - 注：“-”表示未见明显异常 
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[1] ZIMMER T. Effects of tetrodotoxin on the mammalian cardiovascular system[J]. Mar Drugs, 2010, 8(3): 741-762. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20411124/ [2] BIESSY L, BOUNDY M J, SMITH K F, et al. Tetrodotoxin in marine bivalves and edible gastropods: a mini-review[J]. Chemosphere, 2019, 236: 124404. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31545201/ [3] TAMELE I J, SILVA M, VASCONCELOS V. The incidence of tetrodotoxin and its analogs in the Indian Ocean and the red sea[J]. Mar Drugs, 2019, 17(1): 28. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30621279/ [4] MAGARLAMOV T Y, MELNIKOVA D I, CHERNYSHEV A V. Tetrodotoxin-producing bacteria: detection, distribution and migration of the toxin in aquatic systems[J]. Toxins, 2017, 9(5): 166. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28513564/ [5] NIETO F R, COBOS E J, TEJADA M Á, et al. Tetrodotoxin (TTX) as a therapeutic agent for pain[J]. Mar Drugs, 2012, 10(2): 281-305. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22412801/ [6] MATTEI C. Tetrodotoxin, a candidate drug for Nav1.1-induced mechanical pain? [J]. Mar Drugs, 2018, 16(2): E72. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29470418/ [7] SALAS M M, MCINTYRE M K, PETZ L N, et al. Tetrodotoxin suppresses thermal hyperalgesia and mechanical allodynia in a rat full thickness thermal injury pain model[J]. Neurosci Lett, 2015, 607: 108-113. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26424077/ [8] QIU F, JIANG Y G, ZHANG H, et al. Increased expression of tetrodotoxin-resistant sodium channels Nav1.8 and Nav1.9 within dorsal root Ganglia in a rat model of bone cancer pain[J]. Neurosci Lett, 2012, 512(2): 61-66. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22342308/ [9] NEWMAN D J, CRAGG G M. Drugs and drug candidates from marine sources: an assessment of the current “state of play”[J]. Planta Med, 2016, 82(9-10): 775-789. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26891002/ [10] JAL S, KHORA S S. An overview on the origin and production of tetrodotoxin, a potent neurotoxin[J]. J Appl Microbiol, 2015, 119(4): 907-916. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26178523/ [11] LAGO J, RODRÍGUEZ L P, BLANCO L, et al. Tetrodotoxin, an extremely potent marine neurotoxin: distribution, toxicity, origin and therapeutical uses[J]. Mar Drugs, 2015, 13(10): 6384-6406. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26492253/ [12] MCNABB P S, TAYLOR D I, OGILVIE S C, et al. First detection of tetrodotoxin in the bivalve Paphies australis by liquid chromatography coupled to triple quadrupole mass spectrometry with and without precolumn reaction[J]. J AOAC Int, 2014, 97(2): 325-333. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24830143/ [13] TURNER A D, POWELL A, SCHOFIELD A, et al. Detection of the pufferfish toxin tetrodotoxin in European bivalves, England, 2013 to 2014[J]. Euro Surveill, 2015, 20(2): 21009. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25613778/ [14] KIRCHHOF P, TAL T, FABRITZ L, et al. First report on an inotropic peptide activating tetrodotoxin-sensitive, “neuronal” sodium currents in the heart[J]. Circ Heart Fail, 2015, 8(1): 79-88. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25424392/ [15] MATSUMOTO T, FEROUDJ H, KIKUCHI R, et al. DNA microarray analysis on the genes differentially expressed in the liver of the pufferfish, Takifugu rubripes, following an intramuscular administration of tetrodotoxin[J]. Microarrays (Basel), 2014, 3(4): 226-244. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27600346/ [16] 王敏, 臧奎, 尚福泰, 等. 河豚毒素中毒致心跳呼吸骤停1例[J]. 临床急诊杂志, 2014, 15(1): 54-55. https://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?filename=ZZLC201401024&dbname=CJFD&dbcode=CJFQ [17] 张桦, 赵剑. 河豚毒素中毒致急性肾脏损害5例报告[J]. 中国实用内科杂志, 2002, 22(5): 303. https://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?filename=SYNK200205028&dbname=CJFD&dbcode=CJFQ [18] 徐勤惠, 黄凯, 高莉莎, 张翰, 荣康泰. 河豚毒素对小鼠和家兔的毒性研究[J]. 卫生研究, 2003, 32(4): 371-374. https://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?filename=WSYJ200304022&dbname=CJFD&dbcode=CJFQ -
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